【摘 要】
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【目的】本试验为研究氟中毒对动物肾脏损伤的作用机制及不同浓度硒在Nrf2-ARE信号通路中缓解氟中毒的效果,并有效筛选硒的补充剂量。【方法】选取SD雄性大鼠50只,平均分为对照组（C,蒸馏水）、攻氟组（F,100mg/L Na F水）和Ⅰ组（0.5 mg/L Na2Se O3,100 mg/L Na F水）,Ⅱ组（1 mg/L Na2Se O3,100mg/L Na F水）,Ⅲ组（2 mg/L N
【基金项目】
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国家自然基金（31972751）； 山西省自然基金（201901D111230,201901D211374）； 山西省研究生教育改革研究课题（2019JG081）；
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【目的】本试验为研究氟中毒对动物肾脏损伤的作用机制及不同浓度硒在Nrf2-ARE信号通路中缓解氟中毒的效果,并有效筛选硒的补充剂量。【方法】选取SD雄性大鼠50只,平均分为对照组（C,蒸馏水）、攻氟组（F,100mg/L Na F水）和Ⅰ组（0.5 mg/L Na2Se O3,100 mg/L Na F水）,Ⅱ组（1 mg/L Na2Se O3,100mg/L Na F水）,Ⅲ组（2 mg/L Na2Se O3,100 mg/L Na F水）,试验10周后采集血清、肾脏组织,测量血清Ca2+、Scr、BUN、MDA、CAT、GSH-Px、ROS的含量,观察肾脏组织结构,检测Mst1/2、Nrf2、Keap1、HO-1、NQO1、MEK5、ERK5、AMPK、e NOS、PI3K、Calpain2基因及蛋白表达情况。【结果】1.与C组相比,F组Scr、MDA、ROS显著升高（p<0.05、p<0.01）,CAT显著降低（p<0.001）。与F组相比,Ⅰ组CAT明显降低（p<0.01）;Ⅱ组MDA、ROS明显降低（p<0.01、p<0.001）,GSH-Px显著上升（p<0.05）;Ⅲ组Scr、MDA明显降低（p<0.05）。2.HE染色结果显示,与C组相比,F组肾脏细胞水肿,坏死,空泡化。与F组相比,Ⅱ、Ⅲ组损伤程度明显改善。IHC染色结果显示,HO-1、NQO1蛋白在F组阳性着色最强,附着在胞质中,Nrf2蛋白在F组阳性着色最强,广泛分布于胞质和核内,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组均得到一定程度缓解。3.qRT-PCR检测结果显示,与C组相比,F组HO-1、NQO1、Nrf2的m RNA表达量升高（p<0.05、p<0.01）,Keap1、e NOS、MEK5、ERK5的m RNA表达降低（p<0.05、p<0.01）。与F组相比,Ⅰ组Nrf2、HO-1、NQO1 m RNA表达量显著下降（p<0.05、p<0.01）;Ⅱ组Nrf2、HO-1、NQO1 m RNA表达量显著下降（p<0.05、p<0.01）。Ⅲ组Nrf2、HO-1、NQO1 m RNA表达量显著下降（p<0.05、p<0.01）。4.Western-blot检测结果显示,F组与C组比较,氟摄入导致HO-1、Mst2蛋白表达显著增加（p<0.05、p<0.01）,Nrf2蛋白显著降低（p<0.001）。与F组相比,Ⅰ组HO-1、Nrf2、NQO1蛋白表达明显升高（p<0.05、p<0.01）,Mst2蛋白表达显著下降（p<0.001）;Ⅱ组NQO1、HO-1蛋白表达显著升高（p<0.05、p<0.01）,Mst2、Mst1、Calpain2蛋白表达明显下降（p<0.05、p<0.01）;Ⅲ组HO-1、Nrf2、NQO1蛋白表达显著升高（p<0.05、p<0.01）,Mst1、Mst2、Calpain2蛋白表达显著下降（p<0.05、p<0.01）。【结论】100 mg/L Na F对大鼠肾脏具有明显的损伤,膳食中补充硒可以通过Nrf2-ARE信号通路缓解氟对肾脏的损伤作用,其中补充1 mg/L的硒缓解效果较好。
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