大鼠20αHSD基因5'侧翼区结构的分子克隆及其调控活性的测定

来源 :山东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Janette
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大鼠20α-羟类固醇脱氢酶(20α-hydroxysteroid dehydrogenase,20αHSD)属于醛酮氧化还原酶系成员,在大鼠卵巢中以NADPH为辅酶将孕酮转变为低或无活性的20α-羟孕酮.20αHSD在妊娠早、中期处于静息和低表达状态,而中、后期的表达则逐渐增加,分娩前一天其活性达到高峰,表现为mRNA表达和酶蛋白含量同时急骤增加,引起血中孕酮骤降,是妊娠终止的重要内在原因.催乳素(prolactin,PRL)和绒毛膜促性腺激素(chorionic gonadotropin,CG)是妊娠后期调节20αHSD活性和基因表达的重要激素.该研究工作主要分以下三个部分:第一部分运用PCR技术从大鼠Promoter Finder文库中扩增到了2.5kb的20αHSD基因5侧翼区序列,并对其进行了序列测定.第二部分为了检测20αHSD基因5侧翼区调控区序列的活性.第三部分将pGL3-2.5、pGL3-1.6和pGL3-338分别与pRL-SV40共转染CHO细胞和COS7细胞,分别加入催乳素和人绒毛膜促性腺激素(hCG),观察两种激素对20αHSD基因5侧翼区调控区的表达调控作用.
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