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唐菖蒲根腐病,又称枯萎病、干腐病。是由尖孢镰刀菌唐菖蒲专化型(Fusarium oxysporum f. sp. gladioli)引起的维管束病害,主要危害唐菖蒲的球茎及根部,引起植株枯萎,已成为唐菖蒲栽培过程中发生的主要病害之一。目前控制该病害发生的主要措施是化学药剂防治及轮作换茬等方法,不但防治成本高、防治效果差且易导致病菌的抗药性,造成环境污染,因此培育抗病品种是经济有效的防治措施。然而唐菖蒲切花生产主要是以子球茎进行无性繁殖,品种退化严重,又缺乏有效的育种途径,因此通过离体培养筛选唐菖蒲抗根腐病无性系是新的快捷而有效的育种途径。本研究以唐菖蒲主栽品种货车(Gladiolus’Wagon’)和超级玫瑰(Gladiolus’Rose Supreme’)为试材,在分离、纯化及培养唐菖蒲根腐病菌的基础上,优化病菌产毒培养条件,分析唐菖蒲根腐病菌粗毒素对对其致毒作用,并以粗毒素为筛选压力,以唐菖蒲子球诱导的愈伤组织及经EMS诱变后的无性系作为筛选材料,对唐菖蒲抗根腐病变异无性系进行筛选和初步鉴定,并对获得的再生植株体内防御酶活性变化进行分析,以期建立唐菖蒲抗根腐病体细胞无性系的变异体系,探索唐菖蒲抗病育种的新途径。本研究主要结果如下：1.从田间发病的典型病株分离纯化唐菖蒲根腐病菌,经初步鉴定为尖孢镰刀菌唐菖蒲专化型((Fusarium oxysporum f. sp. gladioli),适宜唐菖蒲根腐病菌生长的培养液为PD培养基,病菌产毒量最适培养液为Czapek培养基,适宜该菌生长的条件是24～30℃、pH6.0-7.0、黑暗培养,振荡培养方式对菌丝生长影响较不大；在温度27℃、pH7.0、黑暗、震荡培养有利于病菌产毒。粗毒素具有很强的热稳定性,且对唐菖蒲幼苗具有强烈毒性,能够导致幼苗萎蔫；2个唐菖蒲品种的根系细胞膜透性、根系活力和丙二醛含量的变化能反映粗毒素对唐菖蒲的致毒作用；低浓度粗毒素胁迫下货车品种对病菌粗毒素的忍耐力强于超级玫瑰品种。2.通过一步筛选法和多步筛选法筛选唐菖蒲抗根腐病无性系,结果表明多步筛选法可以提高愈伤组织对粗毒素的抗性,当粗毒素浓度达到50%时,2个品种愈伤组织的存活率与对照相比分别提高了28.33%、27.00%,与一步筛选法相比愈伤组织存活率分别提高了19.00%、18.66%,因此多步筛选法是进行唐菖蒲抗根腐病无性系筛选的适宜方法。3.对经EMS诱变后的不定芽进行抗唐菖蒲根腐病无性系筛选的结果表明,当粗毒素浓度为50%时,EMS诱变芽获得21个抗性芽,是未经EMS诱变处理的不定芽数量的3倍；经抗性鉴定结果表明,经过EMS诱变的超级玫瑰不定芽经连续加压筛选后,与未经EMS诱变处理相比不定芽存活率提高了13.17%,不定芽增殖率提高了24.16%。说明进行抗病无性系筛选之前用EMS诱变剂进行诱变处理,能够扩大其变异频率。4.对抗根腐病无性系再生植株进行抗性鉴定,抗性再生植株对病菌粗毒素及病菌孢子悬浮液的抗性水平均比对照有显著的提高,且对病菌粗毒素的抗性高于对病菌的抗性。共获得货车抗根腐病再生植株3株、超级玫瑰抗根腐病再生植株9株,其中经EMS诱变后筛选获得的抗性再生植株8株。5.抗性再生苗在受病菌粗毒素胁迫的48h内,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(PDD)活性变化趋势为先升高后降低。经筛选后的抗性再生苗三种酶的活性均显著高于对照苗,其中2个品种筛选苗的PAL活性峰值分别是对照苗峰值的1.43倍和1.50倍,PPO活性峰值分别为对照苗峰值的1.47倍和1.99倍,POD活性峰值分别为对照苗峰值的1.53倍和1.70倍,表明唐菖蒲对根腐病菌粗毒素的抗性与这三种酶活性呈正相关。