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骨关节炎(OA)是常见的老龄动物多发的关节疾病,严重影响动物正常关节功能并使动物生活质量降低。临床上主要治疗方法包括手术置换、非甾体类抗炎药(NSAID)以及改善饲养管理,但是每种治疗方法都具有各自的局限性,所以急需寻找副作用小、能长期使用的药物。植物药逐渐成为近些年来的研究热点。L-茶氨酸(L-Theanine)是茶叶中的非蛋白氨基酸,具有抗炎、抗凋亡以及抗肿瘤等多种生物活性。基于此,本试验使用前十字韧带切断术(ACLT)造模的OA大鼠,将L-Theanine与非甾体类抗炎药(塞来昔布)进行对比,探究其对OA的保护效果,同时通过对患犬临床治疗试验,观察其治疗效果。试验分为在体试验、离体试验和临床治疗效果观察三部分。在体试验用ACLT造模,分为假手术组、模型组、L-Theanine治疗组(分低、中、高三个剂量)以及塞来昔布组。空白组和模型组造模之后第二天开始每天灌服1 mL生理盐水,治疗组灌胃给予L-Theanine(50mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg)持续六周;塞来昔布组于第四周开始灌服塞来昔布(2.86mg/kg),直到第六周。所有动物于6周后脱颈处死,取血清及关节软骨用于检测iNOS、NO、COX-2和PGE-2的含量;取胫骨用甲醛固定,进行HE染色及番红O-固绿染色;离体试验使用二代软骨细胞,试验分为五组:1)空白对照组2)IL-1β模型组:10 ng/mL IL-1β处理24 h;3)试验组(分三个剂量)10 ng/mL IL-1β预处理24 h后加入50μM、100μM、200μM L-Theanine共同作用24 h。Western Blot检测:COX-2、iNOS、MMP-3、MMP-13蛋白表达水平,q-PCR检测MMP-3、MMP-13,试剂盒检测细胞培养液上清中NO、PGE-2含量;临床治疗效果只观察患犬症状改善情况。在体试验结果显示造模组相对于空白组iNOS、NO、COX-2和PGE-2的含量升高,L-Theanine治疗组与造模组相比,这四个指标的表达都减少,且高剂量组(200 mg/kg)与塞来昔布组相比无显著差异;组织切片可以观察到造模组与假手术组相比软骨破坏较严重,L-Theanine治疗组和塞来昔布给药组的软骨破坏程度均较轻。离体试验结果显示MMP-3、MMP-13、COX-2、iNOS四种蛋白造模组比空白组表达显著增加,而L-Theanine干预组显示蛋白表达量下降,呈剂量依赖性;细胞培养上清中NO、PGE-2的含量造模组与空白组相比显著增加,L-Theanine治疗组其含量明显减少;临床疗效观察显示,L-Theanine能够缓解犬骨关节炎引起的关节敏感、步态强拘以及姿势异常,改善患犬生活质量。试验结果表明,L-Theanine可以减轻ACLT诱导的大鼠OA模型的炎症反应,而且可以减轻IL-1β刺激后的软骨细胞的基质降解以及降低炎症因子的表达,从而缓解骨关节炎的症状。