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目的:探讨核转录因子GATA-3表达在支气管哮喘小鼠发病机制中的作用及GATA-3圈套寡核苷酸(decoy ODNs)治疗支气管哮喘的可行性。
方法:采用卵蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏方法建立支气管哮喘小鼠模型。将32只雌性BALB/c小鼠随机分为四组(每组8只):正常对照组(A组),哮喘模型组(B组),GATA-3 decoy ODNs组(C组),无义decoy ODNs组(D组)。GATA-3 decoyODNs和无义decoy ODNs在OVA激发前经鼻腔局部给药。HE染色切片观察小鼠气道炎症变化;免疫组化方法观察GATA-3阳性细胞数;用RT-PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠肺组织白细胞介素-5(IL-5)、IL-13 mRNA和蛋白质的表达;同时收集小鼠支气管肺泡灌洗液(b:FONChoalveolar larage fluid,BALF),进行嗜酸性粒细胞(eosinophils,EOS)计数。
结果:
(1)哮喘模型组小鼠肺组织中GATA-3表达水平明显高于正常对照组(P<0.05)。
(2)哮喘模型组小鼠肺组织IL-5、IL-13 mRNA及蛋白质的表达水平均明显高于正常对照组(p<0.05);GA]、A-3 decoy ODNs组小鼠肺组织IL-5、IL-13 mRNA及蛋白质的表达水平均明显低于哮喘模型组(p<0.05);而无义decoy ODNs组与未治疗的哮喘模型组小鼠相比,上述指标差异无显著性(p值均>0.05)。
(3)哮喘模型组小鼠BALF中EOS数量明显多于正常对照组(P<0.05):GATA-3 decoy ODNs组小鼠BALF中EOS数量较哮喘模型组显著减少(p<0.05):而同样无义decoy ODNs组与哮喘模型组小鼠相比,上述指标差异无显著性(p>0.05)。
(4)哮喘小鼠肺组织中GATA-3的表达水平与肺组织中IL-5、IL-13 mRNA及蛋白质的表达水平呈显著正相关(p均<0.05)。
结论:哮喘小鼠肺部存在GNTA-3的高表达,GATA-3 decoy ODNs能够减少哮喘小鼠肺部Th2型细胞因子(IL-5、IL-13)的表达,减轻哮喘小鼠BALF中炎症细胞以及EOS浸润程度,从而减轻气道炎症反应。GATA-3在BALB/c小鼠哮喘模型效应阶段气道炎症中具有重要作用。