二维液相色谱系统的构建及在生物样品分离中的应用

来源 :中国地质大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sima1969
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二维液相色谱是近年来发展起来的一种高效分离技术,正交的二维系统在分辨率、峰容量方面比一维情况都有所增加,已成为复杂体系组分分离和分析的强有力工具,在生命科学尤其是蛋白质组研究中得到了广泛的应用。 本论文是在“十五”国家科技攻关重大项目《科学仪器研制与开发》、“973”《人类重大疾病蛋白质组学研究》以及国家自然科学基金资助项目《多维分离系统的输运特征与正交性研究》的支持下完成的。论文在阐述二维液相色谱基本原理的基础上,对二维液相色谱在近年蛋白质组研究中的应用加以系统总结,重点探讨不同接口形式二维液相色谱系统的构建,并进行系统评价,对复杂生物样品进行了分离分析。论文主要包括:在线二维液相色谱系统的构建与评价,离线二维液相色谱系统的构建与应用,对特殊结构二维液相色谱系统构建的探讨。 将第一维洗脱的样品组分有效地切割导入第二维是整个二维系统接口设计的关键。样品环交替储存转移样品、平行柱交替富集分析样品、捕集柱富集样品以及整体两相式色谱柱无接口的形式是常用的柱切换技术。 论文第二章以平行柱交替富集分析形式接口的WAX/RP及GFC/RP两种在线二维系统为例说明在线二维系统构建的一般方法,并以标准蛋白质混合物的分离进行系统评价。两种二维系统的总峰容量分别为189和225,在一维模式无论是WAX、GFC还是RP都不能完全分开的测试样品,在二维系统中得到了较好的分离。但这种接口构成的二维系统的峰
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