【摘 要】
:
小麦赤霉病菌产生的毒素不仅在病害发展过程中具有加重赤霉病的作用,而且污染谷物导致严重的食用安全性问题。脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)是其产生的最重要的一种
论文部分内容阅读
小麦赤霉病菌产生的毒素不仅在病害发展过程中具有加重赤霉病的作用,而且污染谷物导致严重的食用安全性问题。脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)是其产生的最重要的一种毒素,由于DON的危害严重,引起了各国的普遍重视,建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法显得十分迫切。真菌毒素的检测传统上一直是以色谱化学技术为依托,但免疫检测方法具有检测快速、费用低廉、易于操作、简单易携、且高灵敏度等特点,近年来日益受到国内外广泛的关注。本试验旨在制备可用于检测被脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染的粮谷类特异性单克隆抗体。本试验首先将脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的衍生物3-半琥珀酰-脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-HS-DON)与卵清蛋白(OVA)采用碳化二亚胺法进行偶联得到人工抗原,以此人工抗原免疫BAL B/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP 2/0鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌DON抗体的单克隆细胞株(3B2),并制备单克隆抗体腹水。经检测3B2的抗体类型及亚类均为IgG1,其轻链为κ链.腹水通过间接酶联免疫吸附测定效价在1×107以上。该单克隆抗体与脱氧雪腐镰刀菌烯醇特异性结合反应的50%抑制质量浓度为29μg/L,除与3-acetyldeoxynivalenol(3-Ac-DON)的交叉反应率为78.38%,与其他脱氧雪腐镰刀菌烯醇结构类似物无交叉反应,具有较高的灵敏度和特异性,有较好的应用价值。本研究成功制备的高亲合力和高特异性的抗DON单克隆抗体,为建立谷物和农产品中DON的快速免疫检测技术奠定了基础。选取杂交瘤细胞株3B2所分泌的抗体进行研究,建立了ELISA检测体系,其检测条件为:样品提取液甲醇的浓度为8%,包被抗原3-HS-DON-BSA浓度2μg/mL,腹水稀释至1×10-7,2%卵清蛋白(OVA)作为封闭物;OD450吸光值作纵坐标与DON浓度(μg/mL)的对数值作横坐标建立检测曲线,在0.01μg/mL-10μg/mL范围内呈显著线性关系,检测方程为y=0.2396x+0.3177,相关系数达0.9999,检测极限值为11μg/L。批内和批间变异系数分别为1.2%和4.7%,标样的添加回收率分别为90.73%、89.30%、86.80%和80.12%。
其他文献
本文用有向图论,对三个或三个以上采场归结为若干不同组合关系,根据开采顺序把各个中段、各条矿脉(或矿体)的所有采场全部连接起来,绘制成一个开采顺序网络,并用电子计算机求
目的:观察分析CEA和C A199在胃癌诊断和临床病理分期中的应用价值.方法:选取我院2013年2月~2015年2月收治的62例胃癌患者作为观察组,选取同时期健康体检人员62例作为对照组,
对儿童患者来说,围术期是他们要经历的一个特殊时期;由于自身疾病造成的痛苦,加之认知能力有限,自控能力差,在紧张的医疗氛围中,小儿的心理状态与成人有着明显的差异,小儿手
澳大利亚矿产资源局估计,该国已证实的磷矿储量有20多亿吨,另有推测储量19亿吨。鉴于目前国际市场上磷矿价格低廉,大规模开采这些矿床是不经济的。但在九十年代传统资源储量
目的:对腹腔镜联合胆道镜在胆囊息肉合并胆结石患者中的治疗效果进行调查.方法:选择我院2014年4月-2015年4月间76例胆囊息肉合并胆结石患者,根据患者住院号将患者分为两组,单
摘 要:一直以来,我们国家的科学技术一直呈现猛烈的发达状态,改革开放以来人们生活质量有的很大程度的提升,尤其是近些年来科技迅猛发达,人们对电能的需求也越来越高。随着社会各行各业以及千家万户用电量的增大,变压器在传送电流的过程中,很容易发生故障。如果一旦故障发生对每个行业都会造成不必要的经济损失,对每个家庭来说都不能正常供电。所以,文章对对电力变压器在传输电能的过程中经常遇到的一些故障进行了分析和总
在总结立井提升事故教训的基础上,我们根据煤炭部的有关规定试制了立井提升信号罐门闭锁装置。其作用是只有人员或车辆安全进出罐笼、把钩工将罐门关好后,信号工才能发出走
摘 要:文章针对防城港九龙寨海堤所在区域的地理特点,根据水土流失特点预测防治目标,提出防治方案并分析其生态效益。 关键词:水土流失;防治措施;生态效益 1 概述 1.1 项目概况 九龙寨海堤工程位于防城港市港口区企沙镇东面,濒临北部湾。工程按10年一遇防潮标准,工程级别为5级。工程新建海堤堤线总长3114m,涝涵管14个,纳潮闸2个,码头1座,扩建防汛抢险道路1km。工程由主体工程区、施工
目的:探讨恒康正清肠道准备在减少痔疮患者术后并发症的效果.方法:选择2013年5月~2014年5月入住我科行痔疮手术的住院患者100例.随机分为对照组和观察组各50例.分别用口服恒
目的:分析采用纳洛酮治疗脑血栓的临床疗效.方法:选取我院2015年1月~2016年1月收治的脑血栓患者72例,分为两组,常规组行常规治疗,观察组则采用纳洛酮治疗,分析两组治疗疗效.