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目的:探讨Survivin、NF—κB和PCNA与胶质瘤临床病理类型的相关性以及三者在胶质瘤中表达的相关性。进一步明确它们在胶质瘤发生、增殖、恶变和复发中的作用。为胶质瘤寻找新的治疗途径。
胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤之一,肿瘤的发生被认为是受多基因协调控制的细胞增殖和细胞凋亡过程失衡的结果。Survivin基因是一个凋亡蛋白抑制家族的新成员,通过抑制效应caspase分子来抑制细胞凋亡途径。并且抗survivin主动免疫反应可能发生的证据也逐渐增多。核转录因子KB(Nuclear factor-kappa b,NF-κB)是一类广泛存在于细胞中的多显性核转录因子,属Rel基因家族。在肿瘤细胞中其具有调控多种基因转录表达的能力,与肿瘤细胞的生长、增殖和侵润、转移的关系密切,还能调控肿瘤细胞的调亡和免疫活性,此外,高水平的NF-κB还可影响细胞外基质的产生及其功能。PCNA(增殖细胞核抗原)是肿瘤细胞增殖活动可靠的标志物。本文通过检测survivin、NF-κB和PCNA蛋白在胶质瘤中表达情况,应用统计学分析,探讨三者与胶质瘤临床病理类型的相关性以及三者在胶质瘤中表达的相关性,进一步明确它们在胶质发生、增殖、恶变和复发中的作用,以试图为胶质瘤的诊断和治疗提供新的思路和依据。
方法:选取河北大学附属医院神经外科2006年1月至2009年5月手术切除的48例胶质瘤标本及存档蜡块,其中男性31例,女性17例年龄15~76岁,平均50.7±10.6。病程1~23个月。用免疫组化S-P法检测48例不同级别脑星形细胞瘤中Survivin、NF-κB和PCNA的表达情况,另取同期因急性颅脑损伤行内减压手术切除的正常脑组织5例作为对照。所有标本均经过10%甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋后存档备用。每例标本以4μm厚度连续切片,并作HE染色确定病理组织类型。阳性病理组织切片随机选择5个高倍视野(400×),每个视野计数200个肿瘤细胞,计算1000个肿瘤细胞中survivin、NF-κBp65或PCNA蛋白的阳性表达率。免疫反应按照下述标准判定:阳性细胞数0为阴性(-);阳性细胞数<30%为(+);阳性细胞数30~50%为(++),阳性细胞数≥50%为(+++)。选择肿瘤细胞标记密集的区域评估PCNALI,PCNA-LI为阳性染色细胞数在1000个肿瘤细胞中所占的比例(每张切片选取10个高倍视野,每个视野计数100个肿瘤细胞)。
结果:48例人脑胶质瘤中survivin、NF-κB p65和PCNA的阳性表达率分别为66.7%、58.33%、47.92%。在5例正常对照组中未见survivin、NF-κB p65和PCNA表达,survivin、NF-κB p65和PCNA在不同级别脑胶质瘤的阳性表达率之间有显著性差异。NF-κB p65在低级别组(Ⅰ~Ⅱ级)与高级别组(Ⅲ、Ⅳ级)之间的表达有显著性差异(X2=10.428,P<0.05);PCNA在低级别组(Ⅰ~Ⅱ级)与高级别组(Ⅲ、Ⅳ级)之间的表达有显著性差异(X2=13.583,P<0.05);survivin在低级别组(Ⅰ~Ⅱ级)与高级别组(Ⅲ、Ⅳ级)之间的表达有显著性差异(X2=11.658,P<0.05)。随着胶质瘤病理分级的增加,survivin、NF-κB p65和PCNA表达的阳性率及表达强度渐增。NF-κB p65和PCNA的表达之间存在正相关关系;NF-κB p65与survivin及PCNA与survivin的表达间均存在正相关关系。
结论:①Survivin,PCNA和NF-κB蛋白在胶质瘤中广泛表达并和胶质瘤的组织级别密切相关。②Survivin、NF-κB和PCNA在胶质瘤中的表达存在正相关性,影响和促进胶质瘤发生、增殖、恶变和复发。③Survivin、NF-κB过度表达是胶质瘤发生的早期或初始事件,可以作为判断胶质瘤发生或复发的早期诊断指标。④Survivin、NF-κB是胶质瘤免疫治疗理想的靶基因,为胶质瘤(包括术后残余和复发胶质瘤)的治疗提供新的思路和有效方法。