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目的:哮喘是一种严重威胁人类健康的慢性炎症性呼吸道疾病,其发病率和病死率有逐年增加的趋势。随着现代医学的发展,已经明确了易感基因ADAM33、ORMDL3与哮喘的发生密切相关。黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)为中药黄芪主要成分之一,具有抗炎、调节免疫、抗衰老、降压、保肝等作用[1]。本研究通过体外培养人支气管上皮细胞(16HBE),观察中药复方固本防哮饮中君药黄芪的有效单体黄芪多糖对人支气管上皮细胞ADAM33、ORMDL3基因表达的影响,初步探讨其可能的机制,为中医药防治哮喘的研究提供新的突破点。 方法:体外培养16HBE,设APS20ug/ml、100ug/ml、500ug/ml3种浓度组及空白对照组、模型组和地塞米松组。白细胞介素(Interleukin,IL)-4刺激16HBE模拟体内炎症浸润,诱导细胞ADAM33、ORMDL3高表达,RT-PCR及Western Blot方法检测各组细胞中ADAM33、ORMDL3 mRNA和蛋白水平的表达,每组实验独立重复3次。实验数据采用SPSS17.0软件进行统计分析,所有数据以均数±标准差((x)±s)表示,两间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义,P>0.05表示差异无统计学意义。 结果:1.IL-4能够诱导人支气管上皮细胞ADAM33、ORMDL3高表达且呈一定的时间-效应关系。 IL-4能够明显增强ADAM33、ORMDL3的表达,与对照组相比P<0.05,刺激24h后表达更显著,与对照组、12h、18h、36h组相比P<0.01,并且随着时间增加(0-24h)表达也增加。 2.APS能够下调ADAM33、ORMDL3表达。 与模型组相比,黄芪多糖组ADAM33 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),20ug/ml、100ug/ml、500ug/ml3种浓度组之间差异无统计学意义(P>0.05),提示黄芪多糖对ADAM33的影响与浓度无关。与模型组相比,黄芪多糖组ORMDL3mRNA及蛋白表达降低,20ug/ml组较100ug/ml、500ug/ml组下降更明显,提示低浓度抑制ORMDL3的表达作用更显著。 结论:1.IL-4可用于体外模拟哮喘炎症模型。 2.APS可抑制IL-4诱导的16HBE ADAM33、ORMDL3的高表达。 3.APS能够改善患儿体质,一定程度上防治哮喘。