【摘 要】
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采用分批补料的方法发酵重组大肠杆菌C600/pBV-TRAIL生产人可溶性TRAIL蛋白,优化发酵工艺,探索高密度下高表达的方法.首先,在摇瓶实验中,初步探索了菌株的生长特性,并在此基
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采用分批补料的方法发酵重组大肠杆菌C600/pBV-TRAIL生产人可溶性TRAIL蛋白,优化发酵工艺,探索高密度下高表达的方法.首先,在摇瓶实验中,初步探索了菌株的生长特性,并在此基础上确定了发酵培养基的组成.然后,在发酵罐实验中,通过比较几种不同的补料策略:间歇流加、恒速流加、指数流加,摸索了一种流加策略,即指数-匣pH混合流加策略,有效避免了发酵过程中,尤其是诱导阶段乙酸的积累,使TRAIL蛋白在高密度培养条件下,得到高效表达.菌体密度最终达到65g/L(DCW),可溶性TRAIL蛋白占菌体总蛋白的4.2％,含量为1.4g/L.在整个发酵过程中,乙酸浓度接近于0,且未使用任何特殊手段,如纯氧、加压等,简化了发酵工艺,降低了发酵成本,为TRAIL的工业化生产创造了条件.
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