炎症作为一种常见的疾病严重影响着人们的身体健康。研究发现,炎症与动脉硬化、癌症、糖尿病、肥胖等有密切关系。前期相关的研究表明,人PAMM蛋白在HEK293和RAW264.7细胞中的高表达可明显增加细胞内GSH/GSSG比率,保护细胞免受过氧化的损伤,提示该蛋白有抑制或减缓炎症反应的功能。为了研究PAMM对体内外各种炎性反应的影响,本研究拟构建原核表达体系实现PAMM蛋白的体外生产,验证其抗炎效果并探讨其在预防和治疗炎症性疾病的作用。我们成功地构建了p ET28a-Pamm原核表达载体,并在温度为16℃,IPTG浓度为0.8 m M的诱导条件下实现了PAMM在大肠杆菌Rosetta(DE3)的可溶性表达;经镍柱亲和层析纯化之后,可得到纯度大于90%的PAMM蛋白。纯化后的PAMM蛋白用于体外细胞试验,结果表明该蛋白可明显抑制TNF-α、IL-1β和IL-6在转录水平的表达,并可显著减少IL-6和NO的产生。因此,实现PAMM蛋白的高效可溶性表达以及证明其在抗炎方面的显著效果将为该蛋白作为抗炎药物的开发提供可能。