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背景 增生性玻璃体视网膜病变(Proliferative vitreoretinopathy,PVR)是孔源性视网膜脱离后发生的一系列细胞活动,即去分化、迁移、粘附、增殖及分泌细胞外基质,形成增生膜,增生膜的收缩导致视网膜脱离。在这一病变过程中,视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelialcell,PRE)是主要的效应细胞,同时眼内多种生长因子的分泌调节失衡也是形成PVR的重要一环。α—平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α—SMA)作为一组表达在多种类型细胞胞浆中的具有收缩功能的微管微丝结构,是细胞移行和收缩功能的基础,但α—SMA与PVR病变程度的相关性以及PDGF对RPE表达α—SMA的影响,尚未见报道。 目的 ①观察α—SMA在不同级别的增生膜中的定性定量表达;②观察血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)能否促进人RPE表达α—SMA。 方法 ①用免疫组化染色法和免疫荧光法对14例PVR行玻切术时切除的视网膜周膜(periretinal membrane,PRM)进行检查、定性及定量分析;②体外培养的人RPE,分成无血清和含2%血清组,分另在不同浓度的PDGF刺激下,采用MTT比色法观察其对RPE增殖的作用;应用人RPE损伤模型,计数进入缺损区的细胞,定量观察不同浓度PDGF在不同时间点对RPE移行的影响;③在细胞爬片上,利用免疫荧光法检测PDGF能否促进α—SMA的表达。 结果 ①免疫组化染色法显示α-SMA在14例PRM中均有表达,位于胞浆中,其分布与PRM的收缩方向一致。在200倍视野下,α-SMA阳性细 $W14kfqt4A4#k胞比例在PRM Cop中为35/80,在Dop中为5(W;免疫荧光法结果与染色法相符。荧光定量分析:PRMCffiJlg中。七MA阳性荧光总量12.3!,D级膜中(*MA阳性荧光总量为23.o,总量约为C i)IR的1.88倍(Pd.of);③陇殖作用:0.ll仰gL’的PDG均6眺进hRPE的增殖,DMEM组ltyg、L’6郴用最明显,增殖率达 153%;2%DMEM组 sthlapgL’的增殖率为门4%,作用翩:③揪诽用:W能龈删h硼的锹7,并铡量和时间依赖性,丑卜lopgL‘时作用最强,DMEM组移行率为sin%,2%FBS+DMEM组达M;(UPDG呈剂量依赖性,明显促进人RPE表达口-SMA。DMEM组PDGF(stygL‘)的跳胆( 二3)约为PDG帅g·L’)门0.08)的 l.7倍;2%DMEM组w6·L’)的荧光总量门.36)约为omv组nm聊g·L’)的2倍。 结论①卜毛MA广泛存在于PVR增姚中,与病变鹏和膜的收缩过程有关;(glPD F能够促进hRPE的增殖和移行,对RPE表达U-s MAMAwh促进作用,有血清时可以加强这种作用,提示它在M的发病过程中可@$押了重要作用。