细菌粘附是一种普遍存在且十分重要的生物现象,细菌表面存在着能与宿主的粘液或上皮细胞发生特异性粘连的生物化学结构,这种特异性粘连即粘附。粘附是病原菌发挥毒力作用的前提,病原菌只有先粘附于宿主表面,才能进一步侵染机体感染致病,对病原菌粘附能力的研究已成为病原菌毒力研究的一个重要方面。近年,病原菌的粘附机制已引起国内外学者的广泛重视。为了解河流弧菌对大黄鱼粘液的粘附作用,本研究成功地建立了一种新的粘附测定方法——间接ELISA法(最低检测值约104),并利用此法研究了不同培养条件、细菌浓度、孵育时间、孵育温度、pH值、盐度、二价阳离子、碳水化合物等因子以及不同培养阶段、抗体处理、营养饥饿等对河流弧菌粘附作用的影响。结果显示河流弧菌TSB培养,菌浓度约108cfu/mL的条件下粘附量达到最大的条件为：25℃～30℃、pH为6、盐度为5～15、孵育时间150mmin。二价阳离子、大多数碳水化合物等都能促进河流弧菌的粘附作用,而对菌体进行抗体及饥饿处理则会显著降低菌体的粘附作用。本研究在上述结果的基础上,采用转座子标签技术,即通过转座子(mini-Tn10)随机插入突变构建了河流弧菌1.1608突变库,从中筛选到7株粘附缺陷稳定的突变菌株并对其进行PCR鉴定。采用Tail-PCR技术扩增其中3株突变株转座子插入位点的侧翼序列,测序结果在基因库中进行同源比对。结果显示,由于河流弧菌基因组尚未登录基因库,因此仅有突变株C99转座子插入位点侧翼的序列搜索到同源序列,即与Vibrio.sp.EJY3Chromosome2第1176961bp至1179932bp上的厌氧NO还原酶转录调控因子(anaerobic nituic oxide reductase transcription)基因norR的部分片段同源性为89%,而突变株C43和C94插入位点侧翼序列均未能找到同源序列。为进一步获知norR基因在细菌粘附及毒力等方面的相关功能,本研究还对突变株C99进行生长、趋化、成膜等生物学性状的研究,结果表明突变株C99在生长、趋化及成膜能力较野生菌株均明显降低,因此norR基因与河流弧菌粘附功能相关,推测该基因突变后可通过影响细菌的生长、趋化及成膜等方面的生物学特性进而影响河流弧菌的毒力。