植物活性成分的功能性研究:代谢酶活性抑制及抗炎症效果的评价

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随着人类生活水平的提高和科学技术的不断发展,天然、安全、无毒的中草药植物越来越受到关注,中草药植物的研究和开发也取得了许多成果。绿茶、荷叶、枳实和水皂角都是我国分布较广,产量较多的植物。绿茶未经过发酵处理,保持了较多鲜叶内的天然物质,其中茶多酚、咖啡碱保留鲜叶的85%以上。荷叶具有降血脂、减肥、抗菌、清除自由基等作用,它的主要活性成分是生物碱、黄酮类物质和荷叶精油等。枳实含有生物碱等有效成分,具有升压作用、强心作用、增加血流量、抗菌消炎等作用。水皂角中的多酚是新发现的植物多酚类化合物,它除了具有其它植物多酚的共同特性之外,尤表现出强的脂肪酶抑制作用,能有效防止和治疗肥胖。本论文在综述了一些中草药植物的有效成分,以及近年来对它们在抑制脂肪和糖的吸收、抗炎症和免疫方面所做的研究和取得的进展的基础上,结合所在研究室的研究方向,开展了对绿茶、荷叶、枳实和水皂角这四种植物中有效成分的提取,以及这些有效成分对抑制脂肪酶和α-葡萄糖苷酶能力和抗炎症方面的有关研究,并取得了一些有意义的结果。1、对四种中草药的活性成分进行初步提取。绿茶(Green Tea 80%Catechins/ 50%EGCG),荷叶(Lotus Leaf Extract 10:1),枳实(Citrus Aurantum 10%Syneperine)和水皂角(Cassia Normame Leaf Extract 10:1)。2、采用Folin-Ciocalteu法对四种样品进行多酚定量。其中多酚含量最高的是枳实提取物,含多酚462.5 mg/g,荷叶与水皂角的多酚含量相近,分别含有293.8 mg/g和270.3 mg/g。3、用分光光度法对四种样品进行抗氧化功能的评估。通过清除DPPH自由基的试验,得出其中抗氧化能力最强的是绿茶,其后依次是水皂角,荷叶,枳实。IC50值依次为绿茶0.002 mg/ml,水皂角0.021 mg/ml,荷叶0.037 mg/ml,枳实0.061 mg/ml。4、使用化学发光荧光多目的检测仪对四种试验样品进行抑制脂肪酶活性能力的测定。试验测出的能力大小依次是:水皂角>枳实>荷叶>绿茶。IC50值依次为水皂角0.39 mg/ml,枳实0.49 mg/ml,荷叶0.59 mg/ml,绿茶1.40 mg/ml。5、α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用测定。采用分光光度计法测定四种样品的α-葡萄糖苷酶活性抑制作用,结果是绿茶的抑制酶活性能力最强,水皂角也具有较强的抑制能力,荷叶和枳实相对较弱。Maltose组的IC50值依次为绿茶0.01 mg/ml,水皂角0.40 mg/ml,荷叶0.91 mg/ml,枳实>8 mg/ml。Sucrose组的IC50值依次为绿茶0.06 mg/ml,水皂角0.83mg/ml,荷叶0.97 mg/ml,枳实>8 mg/ml。6、细胞培养和抗炎症效果实验。利用老鼠的巨噬细胞RAW264.7作为炎症模型,检测样品是否能够抑制LPS诱导的炎症因子COX-2和iNOS的表达。通过蛋白质印迹试验,发现水皂角提取物则可以有效的控制炎症基因的表达,有抗炎作用。
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