背景:性发育异常（disorders of sex development,DSD）是一组染色体、遗传和性腺表型结构不一致的先天性疾病,在人群中的患病率约为1/4500～1/5500。由于性发育异常疾病的表型和发病机制具有复杂性,故仅有35-45%的46,XY DSD患者和10%的46,XX DSD患者能明确遗传病因。DHX37作为46,XY DSD疾病的新候选致病基因,其基因诊断较困难,且尚不清楚DHX37基因变异导致46,XY DSD疾病的分子机制。对象与方法:本文研究对象为40例散发46,XY DSD患者。（1）对患者进行全外显子组测序,经Gnom AD数据库和包含2114个汉族数据的内部全外显子组测序数据库比对,筛选出DHX37候选致病变异位点,Sanger测序对变异位点进行家系验证。（2）运用多种生物信息学软件（Poly Phen-2、Mutation Taster、PROVEAN、Homolo Gene、Alphafold、Pymol）对DHX37变异位点的蛋白质结构、保守性和功能进行预测。（3）体外细胞功能实验研究DHX37变异位点的致病性:ICC实验研究变异对蛋白亚细胞定位的影响,WB实验研究变异对蛋白质表达量变化的影响。（4）进行RNAi实验后,q PCR和Western Blot实验对DHX37的干扰效率进行验证;再进行转录组测序及分析,q PCR验证差异表达基因,从而对DHX37变异导致46,XY DSD的分子机制进行初步探索。结果:（1）在40例散发的46,XY DSD患者中筛选出2个DHX37的候选致病变异位点:c.319G＞A（p.Glu107Lys）和c.2012G＞C（p.Arg671Thr）。（2）生物信息学分析均显示变异位点蛋白质功能受损,与野生型DHX37蛋白质结构对比,变异蛋白的氢键数量和相互作用的氨基酸均发生了不同程度的改变。（3）ICC实验显示,2个变异蛋白的亚细胞定位均未出现变化,与核仁共定位;Western Blot实验结果显示,与野生型相比,2个变异蛋白表达水平明显下降。（4）转录组测序分析后筛选出与DSD相关的差异表达基因63个,包括24个上调基因,39个下调基因。经q PCR实验验证后发现各基因的m RNA表达趋势与转录组测序结果一致。结论:（1）在40例散发的46,XY DSD患者鉴定出2个DHX37的候选致病变异位点,这2个位点均无文献报道。（2）体外细胞功能实验表明,2个DHX37变异蛋白的亚细胞定位未发生改变,但蛋白表达量显著降低,提示DHX37基因变异的致病机制可能为单倍剂量不足。（3）q PCR实验对差异表达基因的验证提示:DHX37变异可能影响男性性腺发育的GATA4-AR通路或女性性腺发育的LHX9-NR5A1-RSPO1通路,从而引起46,XY DSD。