eIF4E对人食管鳞癌裸鼠移植瘤及化疗敏感性的影响

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目的:通过裸鼠皮下移植瘤的体内实验,观察真核细胞翻译起始因子4E (eukaryotic initiation factor4E, eIF4E)的表达对人食管鳞癌生长速度及其对顺铂的化疗敏感性的影响。方法:1、复苏未处理的食管鳞癌EC9706细胞及前期已建立的eIF4E沉默食管鳞癌EC9706细胞和eIF4E过表达食管鳞癌EC9706细胞,进行传代培养,建立三种人食管鳞癌裸鼠移植瘤动物模型予以顺铂干预,生理盐水对照。2、观察裸鼠及皮下移植瘤的一般情况,记录各组移植瘤的生长情况、绘制肿瘤生长曲线,处死裸鼠,完整剥离肿瘤组织,称量移植瘤重量。3、通过qRT-PCR、Western Blot和免疫组织化学法对各组移植瘤组织中eIF4E的表达进行检测。结果:1、成功建立人食管鳞癌EC9706不同细胞株的裸鼠移植瘤模型,经HE染色病理学检测,证实模型具有类似人食管鳞癌的病理学特征。2、未处理的EC9706细胞接种的裸鼠平均成瘤时间5天,eIF4E沉默EC9706细胞接种的裸鼠平均成瘤时间7天,eIF4E过表达EC9706细胞接种的裸鼠平均成瘤时间4天。顺铂干预后,未处理的EC9706细胞接种组裸鼠皮下移植瘤体积为1341.49±333.43mm3,瘤重为1.3745±0.3685g;eIF4E沉默EC9706细胞接种组裸鼠皮下移植瘤体积为658.92±472.12mm3,瘤重为0.6083±0.2817g,与未处理的EC9706细胞接种组裸鼠比较差异有统计学意义(P<0.05);eIF4E过表达EC9706细胞接种组裸鼠皮下移植瘤体积为2246.75±814.25mm3,瘤重为1.9790±0.4342g,与未处理的EC9706细胞接种组裸鼠比较有显著性差异(P<0.05)。生理盐水干预后,未处理的EC9706细胞接种组裸鼠皮下移植瘤体积为2066.51±543.48mm3,瘤重为2.3671±0.3847g;eIF4E沉默EC9706细胞接种组裸鼠皮下移植瘤体积为1416.27±396.59mm3,瘤重为1.2363±0.4582g,与未处理的EC9706细胞接种组裸鼠比较有显著性差异(P<0.05);eIF4E过表达EC9706细胞接种组裸鼠皮下移植瘤体积为3432.61±878.15mm3,瘤重为2.9912±0.4201g,与未处理的EC9706细胞接种组裸鼠比较有显著性差异(P<0.05)。3、未处理EC9706细胞接种+顺铂干预、未处理EC9706细胞接种+生理盐水对照、eIF4E沉默细胞接种+顺铂干预、eIF4E沉默细胞接种+生理盐水对照、eIF4E过表达细胞接种+顺铂干预、eIF4E过表达细胞接种+生理盐水对照各组裸鼠皮下移植瘤组织用qRT-PCR检测eIF4E mRNA相对表达量,结果分别为:3.7440±0.80317、3.9417±1.15404、1.0767±0.10443、1.0883+0.10323、15.8250±3.43139、15.8533±2.82740:Western Blot检测各组eIF4E蛋白表达量,结果分别为0.7515±0.14425、0.7998±0.18601、0.5391±0.15702、0.5394±0.17053、1.0565±0.23503、1.1386±0.29452;用免疫组织化学法检测各组eIF4E蛋白的免疫组化染色评分分别为:2.4000±1.14018、2.1667±0.75277、1.0000±0.89443、1.0000±0.89443、6.6667±3.01109、7.0000±3.46410。上述检测结果进行统计分析表明:eIF4E沉默细胞接种+顺铂干预、eIF4E过表达细胞接种+顺铂干预与未处理EC9706细胞接种+顺铂干预比较,有显著性差异(P<0.05);eIF4E沉默细胞接种+生理盐水对照、eIF4E过表达细胞接种+生理盐水对照与未处理EC9706细胞接种+生理盐水对照比较,有显著性差异(P<0.05);未处理EC9706细胞接种+顺铂干预与未处理EC9706细胞接种+生理盐水对照比较、eIF4E沉默细胞接种+顺铂干预与eIF4E沉默细胞接种+生理盐水对照比较、eIF4E过表达细胞接种+顺铂干预与eIF4E过表达细胞接种+生理盐水对照比较,均无显著性差异(P>0.05)。结论:1、成功建立未处理EC9706细胞、eIF4E沉默细胞及eIF4E过表达细胞三种人食管鳞癌裸鼠移植瘤模型。2、沉默eIF4E可减缓食管鳞癌生长,eIF4E过表达可加快食管鳞癌生长。3、沉默eIF4E表达的食管鳞癌对顺铂的化疗敏感性增加,eIF4E过表达的食管鳞癌对顺铂的化疗敏感性降低。
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