基于深圳市部分中年2型糖尿病患者尿液的代谢组学研究

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本文分两个部分进行探讨:  第一部分:尿液代谢组学液相色谱-质谱联用技术的建立和优化  目的:建立使用液相色谱-质谱联用技术进行尿液代谢组学检测的方法,并对检测方法进行优化。  方法:使用液相色谱-质谱联用技术对尿液中的小分子代谢物进行非靶向的检测。设定一致的参数,使用QA软件对检测所得特征分子进行提取,记录特征分子数量。比较六种色谱柱、三种流动相以及正负离子模式下分离检测所得到特征分子数。  结果:本研究发现使用相同的色谱柱和流动相,正离子模式检测所得的特征分子响应强度和数量高于负离子模式;使用相同的色谱柱和质谱检测模式,以甲醇/0.1%甲酸为流动相分离检测所得的特征分子数量高于以乙腈/0.1%甲酸和乙腈/纯水为流动相的特征分子数。使用相同流动相和质谱离子模式时,Zorbox SB-C18(3.0mm×100mm×3.5μm)色谱柱分离检测所得特征分子数最多。  结论:使用Zorbox SB-C18(3.0mm×100mm×3.5μm)色谱柱、甲醇/0.1%甲酸为流动相和正离子模式分离检测,可以从尿液样品中获得更多的代谢物信息。  第二部分:中年2型糖尿病患者尿液生物标志初筛  目的:应用代谢组学方法筛选中年2型糖尿病患者经尿液代谢的小分子生物标志。  方法:采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)检测中年2型糖尿病患者和对照对象经尿液的小分子代谢产物,对检测所得总离子流图进行特征离子峰提取(Molecular Feature Exaction,MFE)、滤噪、峰匹配、峰对齐、归一化及基线校正,经t检验筛选在两组研究对象间尿液中表达水平有统计学差异(P<0.05)的代谢产物,并对其进行鉴定。  结果:本研究最终筛选出3个在两组研究对象尿液中表达水平有统计学差异(P<0.05)的代谢物:色氨酸、犬尿酸和犬尿酸原。中年2型糖尿病患者体内代谢产物色氨酸、犬尿酸经尿液代谢的水平下降,犬尿酸原经尿液代谢的水平升高。  结论:色氨酸、犬尿酸和犬尿酸原可能是与中年2型糖尿病相关的生物标志。
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