鸡RE、MD和LL三种肿瘤病诊断方法的建立

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangtian575
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禽传染性肿瘤病是由多种病毒引起的禽的一类传染性疾病。常见的引起家禽传染性肿瘤病的病毒有马立克氏病病毒(Marek’s disease virus)、网状内皮组织增殖病病毒(Reticuloendotheliosis virus)和禽白血病病毒(Avian Leucosis virus)。禽淋巴细胞性白血病(Lympholytic leucosis),马立克氏病和网状内皮组织增殖病在形态学上有相似之处,难以区分。研究的主要内容为:①对其中两种病毒的标准毒株进行培养和复壮;②建立了马立克氏病病毒、网状内皮组织增殖病病毒和禽白血病病毒的PCR检测技术;③对39例发病鸡进行了病理学组织的诊断,并用PCR技术对临床病例进行了检测;④用REV-T株、REV-SNV株和MDV-京1株进行了人工感染实验。研究结果为了解禽三种肿瘤性疾病的发生和诊断提供了实验数据。研究结果表明:鸡胚成纤维细胞在接种REV和ALV病毒后,与正常细胞相比无明显变化。根据LTR设计RE和LL的特异性引物,根据132bp的重复序列设计MD的特异性引物。MD、RE和LL三种病毒的PCR反应可在相同条件下进行,扩增产物大小分别为132bp的重复片段、291bp和182bp。临床病例的病理学检查表明,在肝、脾、肾、法氏囊、腺胃、心肌等组织中均可见到明显的呈灶状或弥散性增生的瘤细胞,并出现瘤细胞核分裂像。用建立的PCR方法对临床采集到的39例鸡肿瘤性病料进行了检测,检查结果为:①13例为马立克氏病阳性,检出率为33.3%;②1例淋巴细胞性白血病阳性,检出率为2.6%;③5例为马立克氏病和淋巴细胞性白血病混合阳性,检出率为12.8%。在临床病例中未检测到网状内皮组织增殖病毒的存在,这一结果与网状内皮组织增殖病病毒酶联免疫吸附试验结果一致。利用马立克氏病的标准毒株京-1株和网状内皮组织增殖病的标准毒株SNV株和REV-T株对SPF鸡分别进行人工感染实验,对发病死亡的鸡进行PCR检测和病理组织学检查,其中马立克氏病病毒的检出率为50%,网状内皮组织增殖病病毒的检出率为66.7%。病理组织学检查在肝、脾、肾、肺、法氏囊和腺胃等组织可看到增生的瘤细胞,核分裂像明显。病理组织学观察发现,PCR检测呈阴性的攻毒鸡也能看到明显的组织学变化,可看到少量的瘤细胞增生。
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