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目的褪黑素主要由松果体分泌。其作为保健药品风靡欧美,FDA批准使用,曾被誉为“90年代的神药”。近年研究发现褪黑素对预防、治疗肿瘤和延缓癌症发展也有一定效果。褪黑素对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞具有抗增殖作用,目前认为褪黑素的作用主要是通过雌激素通路,但在动物模型实验中褪黑素是否同样发生抗肿瘤作用及其可能的机制目前国内尚无相关研究及报道。在本实验中我们通过二甲基苯蒽(DMBA)单次灌胃建立大鼠乳腺癌模型,不同时段加用褪黑素(MT)进行干预,观察褪黑素对二甲基苯蒽诱导大鼠乳腺癌的发生及生长的影响,并通过进行免疫组化染色分析研究褪黑素对ER表达的影响,初步探讨褪黑素对乳腺癌的抑制作用机制。方法选择6周龄健康雌性Wistar大鼠57只,体重范围110-130g,由本校动物中心提供。置于室温(21±2)℃,标准饲料喂养。随机分为3组,每组19只:A组(诱癌前应用褪黑素),B组(诱癌后应用褪黑素),C组(肿瘤对照组)。A组在灌胃给药前2周开始每日向饮用水中加褪黑素溶液饲养,B组、C组给无水乙醇溶媒对比,连续给药14天;在鼠龄约8周时A组、B组、C组按每100g体重20mgDMBA单次性灌胃给药;B组在灌胃给药后每日向饮用水中加褪黑素溶液饲养,A组、C组给无水乙醇溶媒对比,连续给药14天。二甲基苯蒽灌胃致癌后饲养24周,每周一、四观察大鼠,记录肿瘤发生部位、发生时间、肿瘤直径,荷瘤数量,大鼠生长情况,第24周时处死大鼠,切取肿瘤组织记录乳腺肿瘤发生的潜伏期、诱发率、肿瘤体积。肿瘤组织做常规HE染色,利用光镜进行肿瘤细胞病理形态学研究,免疫组化染色(SP法)分析ER表达情况。结果1、肿瘤发生率:A组肿瘤发生率为44.4%,B组肿瘤发生率为50%,C组肿瘤发生率为82.35%,A组、B组的肿瘤发生率明显低于C组(P＜0.05)。2、肿瘤的平均潜伏期:各组动物的肿瘤平均潜伏期:A组为(139.6±18.6)天,B组为(131.4±22.8)天,C组为(115.2±23.6)天,A组、B组的潜伏期明显延长,C组与A组有显著性差异(P＜0.01)。3、平均肿瘤体积:肿瘤体积按公式(V=1/2ab~2)计算,A组为(426.8±194.2)mm~3,B组为(733.3±330.1)mm~3,C组为(2127.1±877.8)mm~3,统计学有意义(P＜0.05)。4、光镜观察:A组8只大鼠12个乳腺肿瘤为乳腺癌,均为浸润性导管癌;B组9只大鼠14个乳腺肿瘤中有13个为浸润性导管癌,细胞分化较好,浸润程度低于对照组,导管内癌1个;C组14只大鼠22个乳腺肿瘤均为乳腺癌,其中浸润性导管癌20个,导管内癌2个。光镜结构显示C组恶性程度明显。5、免疫组化:在Ki67免疫组化染色中,A组阳性率为41.7%,B组阳性率为42.8%,C组阳性率为77.3%,C组与A组、B组有显著性差异(P＜0.05)。ER染色显示A组阳性率为25%,B组阳性率为28.6%,C组阳性率为63.6%,C组与A组、B组有显著性差异(P＜0.05)。结论通过DMBA灌胃可以获得稳定的大鼠乳腺癌模型。褪黑素对DMBA诱发的大鼠乳腺癌的发生和发展有明显的抑制作用。褪黑素对乳腺癌的抑制作用可能是通过抑制雌激素受体表达起作用,其雌激素通路作用可用于人类激素依赖性乳腺癌的治疗研究。