孕激素对LPS作用后的蜕膜细胞形态学变化及PR、IL-1β、COX-2影响的研究

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目的:研究体外培养的人蜕膜细胞用不同浓度孕激素预处理,再加入一定浓度的脂多糖(LPS)后蜕膜细胞的形态学变化及细胞中孕激素受体(PR)及IL-1β、COX-2的表达差异,以探讨孕激素对由微生物感染诱发的自然流产的预防或治疗作用。方法:收集正常早孕期人工流产术中的蜕膜组织,进行体外原代细胞培养,用免疫荧光法检测胎盘泌乳素鉴定蜕膜基质细胞。当蜕膜细胞培养至3-4代后,将其分成6块培养皿;当每块培养皿细胞的贴壁率达到80%时,分别加入含有不同浓度孕激素的培基(Ong/ml、100ng/ml及500ng/ml)处理细胞,每个浓度有两块培养皿。处理24小时后,每个浓度的细胞分别加入含有不同浓度LPS的培养基(Ong/ml、100ng/ml)处理24h。后用HE染色方法及MTT法检测各组细胞之间形态学及细胞生长情况的改变,并采用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测各组中PR、IL-1β及COX-2的表达水平,分析各组间的表达有无统计学差异。结果:1.人原代蜕膜细胞体外培养分离成功,经免疫荧光法检测蜕膜细胞胎盘泌乳素阳性率达95%;2.HE染色后各组细胞之间形态学改变并无差异及MTT检测各实验组的细胞增值率无明显改变;3.LPS能够降低蜕膜细胞中PR的表达,但是蜕膜细胞经高浓度的孕激素预处理后能够拮抗LPS对蜕膜细胞中PR表达的抑制;4.不同浓度孕激素预处理后能够抑制LPS作用后的蜕膜细胞中炎性因子IL-1β、COX-2的表达。结论:1.LPS能刺激蜕膜细胞分泌IL-1β、COX-2,并使细胞中PR表达下调;2.孕激素可拮抗LPS刺激蜕膜细胞对炎性因子的分泌及LPS对PR的抑制作用,上调PR的表达。
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