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背景：肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是习见的恶性肿瘤之一,目前HCC确诊时已多属中、晚期,又由于肿瘤细胞的侵袭转移、凋亡逃避、血管生成以及肿瘤耐药等复杂的生物学行为也为HCC的根治带来一定的困难,预后极差。因此,深入研究肿瘤在这些复杂生物学恶性表型形成中的信号传递及调节机制具有重要的理论和临床应用价值,可为HCC的诊断及治疗提供新的干预靶点。季德胜蛇药片是南通特色中成药之一,在南通乃至全中国都有良好的应用,能够清热解毒,活血化瘀止痛。它目前主要用于治疗蛇虫咬伤伤,但近年来在临床实践中运用该药治疗肝癌也起到一定疗效。因此本研究可为HCC诊断、发病机制及治疗提供新思路,也为HCC治疗提供新的干预靶点。目的：本研究旨在探讨miR-335作为标志物在HCC诊断中的临床价值并研究季德胜蛇药含药血清对肝癌细胞的作用。方法：采用实时荧光PCR检测50例HCC患者以及40例健康人群血清中miR-335相对表达量；采用实时荧光PCR检测miR-335在54例HCC患者癌与癌旁组织中的相对表达量,以及在肝癌细胞株中的表达差异；CCK-8实验检测转染miR-335入HuH-7细胞后对该细胞增殖的影响；CCK-8实验检测季德胜蛇药含药血清对肝癌细胞的影响。实时荧光PCR检测季德胜蛇药含药血清对HuH-7细胞中miR-335的调控作用。Western-blot检测miR-335潜在靶向Bcl-w对HuH-7细胞凋亡的影响。结果：HCC患者血清中miR-335相对表达量明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HCC患者血清中miR-335相对表达量与性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移以及甲胎蛋白(AFP)无相关性(P>0.05),而与有无癌栓相关,差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线分析确定了最佳的miR-335相对表达量的临界值为1.28,灵敏度为78%,特异性为70%,曲线下面积(AUC)为0.75。AFP诊断HCC的灵敏度为76%,特异性为97%,曲线下面积(AUC)为0.83；血清中miR-335与AFP联合检测,灵敏度为84%,特异性为97%,曲线下面积(AUC)为0.93。HCC患者癌组织中miR-335相对表达量较癌旁组织中显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。临床病理分析表明肝细胞肝癌组织中miR-335相对表达量与有无癌栓呈正相关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移以及甲胎蛋白(AFP)无相关性(P>0.05)。细胞筛选结果显示miR-335在HuH-7细胞中显著低表达；miR-335过表达后能显著抑制HuH-7细胞增殖(P<0.01)。季德胜蛇药含药血清能抑制肝癌HuH-7细胞增殖且对肝癌细胞中miR-335起到一定的调控作用。miR-335过表达后通过下调靶向Bcl-w能促进细胞凋亡。结论：肝细胞肝癌患者血清中miR-335表达降低,有望成为一种新的生物标志物用于肝癌的诊断,且与AFP联合检测可提高肝癌的诊断效率。miR-335在HCC患者癌及癌旁组织中相对表达量有显著差异；miR-335过表达能显著抑制HuH-7细胞的增殖能力。季德胜蛇药含药血清能抑制肝癌HuH-7细胞增殖且对肝癌细胞中miR-335起到一定的调控作用。miR-335过表达通过下调靶向Bcl-w促进细胞凋亡。miR-335将有可能成为新的HCC治疗靶向。季德胜蛇药将有望成为治疗肝癌新的药物。