【摘 要】
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目的:软骨缺损治疗的难点在于软骨组织难以进行自主修复。本研究旨在探讨槲皮素对于软骨细胞增殖能力、表型维持的影响,并进一步探讨其对细胞内信号通路调控的分子学机制,为
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目的:软骨缺损治疗的难点在于软骨组织难以进行自主修复。本研究旨在探讨槲皮素对于软骨细胞增殖能力、表型维持的影响,并进一步探讨其对细胞内信号通路调控的分子学机制,为槲皮素在软骨组织工程中的应用提供理论依据。方法:通过噻唑蓝法检测槲皮素对软骨细胞毒性及增殖能力的影响;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测软骨特异性基因的表达,包括:蛋白聚糖(Aggrecan)、II型胶原、SRY相关的HMG盒基因9(SRY(sex determining region Y)-box 9,SOX9)。通过甲苯胺蓝及阿利新蓝染色检测槲皮素对软骨细胞的外基质分泌的影响。通过蛋白免疫印迹实验检测槲皮素对MAPK及AKT通路的影响并探究各通路间相互关系。在抑制相关信号通路的条件下,通过RT-PCR、细胞外基质染色验证槲皮素对于软骨细胞相关表型的影响。结果:槲皮素在一定浓度条件下可促进软骨细胞增殖及软骨表型的维持。在0.5-10μM时槲皮素可促进软骨细胞增殖;在0.5-5μM时槲皮素可促进软骨相关特异性基因的表达及软骨基质的分泌,其中浓度为1.5μM时药物效应最佳。槲皮素还可激活MAPK下游通路ERK、P38及ATK通路,而对JNK通路无明显激活作用。结论:槲皮素可以通过ERK、P38及AKT通路显著促进大鼠关节软骨细胞增殖及维持其表型。
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