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[目的](1)通过实验研究观察不同腧穴预防和治疗失眠的效应比较和相关物质基础研究;(2)观察针刺不同腧穴对失眠患者椎-基底动脉血流速度影响的疗效。
[方法](1)大鼠随机分为模型对照组、“申脉、照海”组、“三阴交”组、“足三里”组、“内关”组和“神门”组,针刺治疗1周后,观察不同针刺方法对阈剂量戊巴比妥钠所致大鼠入睡潜伏期和入睡时间的影响,及阈下催眠剂量戊巴比妥钠所致大鼠入睡率的影响,以观察针刺不同腧穴与戊巴比妥钠的协同预防作用。(2)70只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、“申脉、照海”组、“三阴交”组、“足三里”组、“内关”组和“神门”组,选用PCPA所致失眠大鼠模型,观察针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内5-HT、DA、GABA、GABAA等表达的影响,就其在神经递质方面的作用原理进行探讨。(3)70只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、“申脉、照海”组、“三阴交”组、“足三里”组、“内关”组和“神门”组,选用PCPA所致失眠大鼠模型,观察针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内IL-1、TNF-α等含量的影响,就其在细胞因子方面的作用原理进行探讨。(4)70只大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、“申脉、照海”组、“三阴交”组、“足三里”组、“内关”组和“神门”组,选用PCPA所致失眠大鼠模型,观察针刺不同腧穴对失眠模型大鼠脑内Orexin mRNA表达的影响,就其对神经肽的影响进行探讨。(5)50例合格符合标准的受试者按1:1比例随机纳入申脉、照海组、神门组、内关组、三阴交组和足三里组,通过研究对象治疗前后TCD的对比,观察失眠患者大脑椎.基底动脉血流速度的改善情况,根据TCD的改善情况研究对象治疗后的临床疗效。
[结果](1)申脉、照海、神门、内关、三阴交、足三里均可延长戊巴比妥钠诱导大鼠的睡眠持续时间、增加戊巴比妥钠所致大鼠睡眠的个数,其中申脉、照海催眠作用最好。(2)腹腔注射PCPA可使正常大鼠的睡眠.觉醒周期消失,可降低大鼠脑内的5-HT阳性细胞表达(p<0.05),针刺各组与模型组相比,大鼠脑内5-HT免疫阳性细胞数量明显增多,差异有显著性意义(p<0.05);“神门”组和“申脉、照海”组优于“内关”组、“足三里”组、“三阴交”组(p<0.05)。(3)腹腔注射PCPA可使正常大鼠的睡眠一觉醒周期消失,可升高大鼠脑内的DA阳性细胞表达(p<0.05),模型组与针刺各组大鼠脑内DA阳性细胞数比较差异无显著性意义(p>0.05);针刺各组之间无明显差异(P>0.05)。(4)腹腔注射PCPA可使正常大鼠的睡眠-觉醒周期消失,可降低大鼠脑内的GABA、GABAA阳性细胞表达(p<0.05),各针刺组大鼠脑内GABA、GABAA阳性细胞表达均有明显升高(P<0.05)“申脉、照海”组和“神门”组优于“足三里”组、“三阴交”组和“内关”组比较有显著差异(P<0.05)。(5)腹腔注射PCPA可使正常大鼠的睡眠.觉醒周期消失,降低大鼠脑内IL-I含量。“申脉、照海”组与模型对照组比较有极显著性差异(P<0.01),“神门”组和“足三里”组与模型对照组相比有显著差异(P<0.05)。(6)腹腔注射PCPA可使正常大鼠的睡眠-觉醒周期消失,降低大鼠脑内TNF-α含量。与模型组相比,“申脉、照海”组和“神门”组大鼠脑内TNF-α含量有非常明显升高,具有极显著差异(P<0.01),“足三里”组和“内关”组大鼠脑内TNF-α含量均有升高,具有显著性差异(P<0.05)。(7)半定量测定orexin mRNA的表达情况后发现,腹腔注射PCPA可使正常大鼠的睡眠-觉醒周期消失,可增强大鼠脑内Orexin mRNA的表达(p<0.01),各针刺组oxrexin mRNA表达均低于于模型对照组(P<0.01),“申脉、照海”组oxrexin mRNA表达低于空白对照组。(8)经过对研究对象治疗前后TCD的观察,发现申脉、照海、神门、内关、三阴交、足三里均可明显改善失眠患者椎-基底动脉的血流速度,各针刺组之间没有明显差异。
[结论]
(1)腹腔注射PCPA是复制失眠大鼠模型比较可行的方法,可能是通过降低脑内5-HT等抑制性神经递质的含量来造成大鼠失眠模型。
(2)针刺神门可升高大鼠脑内5-HT、GABA、GABAA的阳性表达,提示这可能神门穴治疗失眠的作用原理。
(3)针刺申脉、照海可升高大鼠脑内GABA、GABAA阳性表达,升高大鼠脑内IL-1、TNF-α的含量,降低大鼠脑内Orexin mRNA的表达,提示这可能是申脉、照海治疗失眠的作用原理。
(4)针刺组改善失眠患者的椎-基底动脉的血流速度,改善失眠患者的大脑供血,从而治疗失眠。
(5)针刺对失眠有良好的预防和治疗作用。