六堡茶中真菌的多样性分析

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六堡茶是一种产于广西梧州市的黑茶,具有其消食解腻,降脂减肥等功效。作为一种发酵茶,微生物不仅参与六堡茶的加工过程,而且对其品质及功效的形成具有重要影响,但目前关于六堡茶中微生物的研究少且不够深入,对其中存在的微生物类群种属不确定。本文对梧州3个具有地理性标识的茶厂的六堡茶样品进行真菌的多样性研究,以期全面了解存在于其中的真菌类群,为优势菌的寻找利用、加工工艺的优化、品质及安全性的研究奠定理论基础。具体研究结果如下:利用高通量测序技术对梧州茶厂的4个成品六堡茶的真菌多样性和群落结构进行了研究,共鉴定得到3个门,7个纲,9个目,6个科及8个属的真菌类群,包括Aspergillus (曲霉属)、Eurotium(散囊菌属)、Penicillium(青霉属)、Blastobotrys、Guehomyces、Rasamsonia、Rossbeevera和Emericella(翘孢霉属)。其中Aspergillus (曲霉属)和Eurotium (散囊菌属)2个菌属的真菌在4个样品中的相对丰度依次为99.85%、90.65%、99.94%和60.37%,同时样品CY4中存在37.69%在属水平上未确定分类信息的菌群。利用传统分离培养技术研究了3个不同茶厂的14个六堡茶样品的真菌多样性,结果表明其真菌数量范围为3.9×102~1.1×106cfu/g,通过传统形态学鉴定结合真菌ITS分子鉴定技术从中分离鉴定得到5个属18个种的微生物,包括曲霉属8种,分别为Aspergillus niger(黑曲霉)、Aspergillus tubingensis(塔宾曲霉)、Aspergillus fumigatus(烟曲霉)、Aspergillus oryzae(米曲霉)、Aspergillus sydowii(萨氏曲霉)、Aspergillus ochraceus (赭曲霉)、Aspergillus tamarii(溜曲霉)、Sclerotium aspergillus(菌核曲霉);青霉属7种,分别为Penicillium citrinum(桔青霉)、Penicillium chrysogenum (产黄青霉)、Penicillium oxalicum (草酸青霉)、Penicillium mallochii、Penicillium chermesinum (鲜红青霉)、Penicillium meleagrinum(斑点青霉)、Penicillium brocae;拟青霉属1种:Paecilomyces varioti (宛氏拟青霉);散囊菌属1种:Eurotium amstelodami(阿姆斯特丹散囊菌);酵母1种:SItephanoascus ciferrii(西弗射盾子囊霉)。其中Sclerotium aspergillus(菌核曲霉),Penicillium chermesinum(鲜红青霉),Paecilomyces varioti(宛氏拟青霉),Penicillium meleagrinum(斑点青霉),Penicillium brocae5种真菌是首次从黑茶中分离鉴定得到。高通量测序技术得出六堡茶中的优势菌主要为Ascomycota(子囊菌门)Eurotiomycetes(散囊菌纲)Eurotiales (散囊菌目)Trichocomaceae(发菌科)真菌,在属水平上以Aspergillus(曲霉属)和Eurotium (散囊菌属)为优势菌属,以青霉属和酵母为次要菌属。结合传统分离鉴定技术也从14个茶样中分离得到了以上4个属的真菌,并在种水平上对其进行了鉴定,这为六堡茶中优势菌群的进一步研究利用奠定了基础。
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