Wnt/β-catenin信号通路对移动性牙根吸收后修复作用的初步探讨

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuhao19881016
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随着社会和经济的发展,愈来愈多的人开始寻求正畸治疗,正畸过程就是牙齿借助各种矫治装置的力量移动到理想位置的过程。在这过程中,牙根吸收是比较常见的并发症之一。移动性牙根吸收属于炎症性吸收,轻者可自行修复,严重吸收可能会导致牙根变短,甚至松动、脱落等,最终影响正畸治疗的长期稳定性。因此,学者们一直在不断的探究并寻求移动性牙根吸收及修复的相关机制和治疗方法。以往研究表明,Wnt/β-catenin信号通路在人体多种组织中发挥着重要作用;在牙齿发育的不同阶段,Wnt/β-catenin信号通路介导多种基因转录。但目前尚未发现其是否在移动性牙根吸收后修复中起作用。因此本实验采用LICL激活以及DKK1抑制Wnt/β-catenin信号通路,运用Micro-CT扫描、H&E染色和免疫组织化学等技术,来初步探讨Wnt/β-catenin信号通路在移动性牙根吸收后修复的作用,为寻求促进移动性牙根吸收后修复方法提供一些依据。实验一:Micro-CT观察激活/抑制Wnt/β-catenin通路对移动性牙根吸收后修复的影响。目的:Micro-CT扫描分析激活/抑制Wnt/β-catenin信号通路对大鼠移动性牙根吸收修复中骨小梁结构参数、表面陷窝体积变化的影响。方法:选取成年雄性SD大鼠60只,以左上第一磨牙为实验侧。运用niti拉簧施加100g力值,牵拉左上第一磨牙向近中移动,并持续加力14天,然后拆除加力装置,将大鼠随机分为三组:licl组、dkk1组和对照组,每组20只。自拆除加力装置起(修复0天),licl组于左上第一磨牙粘膜转折处注射0.2ml/kglicl溶液,每2天注射一次,dkk1组于左侧上颌第一磨牙粘膜转折处注射0.2μg/kgdkk1蛋白,每2天注射一次,对照组不注射任何药物。micro-ct分别扫描三组中修复0天和修复14天的大鼠左上第一、二磨牙及周围的牙槽骨组织,然后处理扫描图像,分析比较两次扫描的骨小梁结构参数和牙根吸收陷窝体积数据。结果采用spss软件分析。结果:修复0天,三组的牙根表面陷窝体积以及骨小梁结构参数bv/tv、tb.n、tb.th、smi和tb.sp无统计学意义(p>0.05)。修复14天,licl组和对照组牙根陷窝体积明显小于修复0天,dkk1组牙根吸收陷窝陷窝体积明显大于修复0天,同组两次测量结果具有统计学意义(p<0.05),licl组牙根吸收陷窝体积修复量大于对照组(p<0.05);licl组和对照组bv/tv、tb.n和tb.th增加,smi、tb.sp减小,dkk1组bv/tv、tb.n和tb.th减少,smi、tb.sp增加;三组smi、tb.n和tb.th的变化量具有统计学意义(p<0.05);licl组和对照组bv/tv、tb.sp的变化量无统计学意义(p>0.05),dkk1组和对照组bv/tv、tb.sp的变化量有统计学意义(p<0.05)。结论:wnt/β-catenin信号通路参与大鼠移动性牙根吸收后修复的过程,激活wnt/β-catenin信号通路能够增强牙根吸收后修复效应。实验二:激活/抑制wnt/β-catenin信号通路对大鼠移动性牙根吸收后修复过程中axin2、β-catenin、bmp-2、bsp和cap表达的影响目的:通过h&e染色和免疫组化技术,观察激活/抑制wnt/β-catenin信号在大鼠移动性牙根吸收修复过程对axin-2、β-catenin、bmp-2、bsp和cap的表达的影响。方法:建立模型同实验一,三组于修复0、3、7、10、14天每组分别随机处死4只大鼠,采用h&e染色观察牙周组织形态学变化,同时免疫组化检测axin2、β-catenin、bmp-2、bsp和cap在牙周组织中的表达,结果通过spss软件分析。结果:1.h&e染色:修复0天,三组sd大鼠左上第一磨牙近中面均呈现典型的牙根吸收现象,主要发生在根颈1/3,并接近牙本质层。随着修复时间的延长,licl组的牙根吸收陷窝逐渐变小,修复7~14天明显减小,修复14天后,左上第一磨牙近中根牙周纤维排列相对规则;dkk1在修复0~10天,牙根进一步吸收,修复10~14天后吸收趋于稳定;对照组在修复0~3天,牙根进一步吸收,10~14天新生牙骨质开始少量形成,修复14天后第一磨牙近中根仍可见吸收陷窝,牙周纤维排列紊乱,牙骨质不连续。2.免疫组化:拆除加力装置后,随着时间增加,licl组axin2、β-catenin、bmp-2、bsp和cap阳性表达量逐渐增加,β-catenin、bmp-2和bsp表达量于修复10天达到峰值;dkk1组axin2、β-catenin、bmp-2、bsp和cap阳性表达量逐渐降低,并于修复10天达到低谷;对照组axin2、β-catenin、bmp-2、bsp和cap表达量未见明显变化。修复0天,三组Axin2、β-catenin、BMP-2、BSP和CAP阳性表达量无统计学意义(P>0.05)。修复3天,三组BMP-2、BSP和CAP的表达量具有统计学意义(P<0.05),LICL组和DKK1组β-catenin表达量有统计学意义(P<0.05);修复7天,LICL组Axin2、β-catenin、BMP-2、BSP和CAP的表达量与DKK1组和对照组比较,具有统计学意义(P<0.05),DKK1组和对照组BMP-2、BSP和CAP的表达量具有统计学意义(P<0.05);修复10、14天,三组Axin2、β-catenin、BMP-2、BSP和CAP的表达量均有统计学意义(P<0.05)。结论:Wnt/β-catenin信号通路在一定程度上能够调控牙根吸收的修复过程中Axin2、β-catenin、BMP-2、BSP和CAP的表达,从而影响移动性牙根吸收修复。
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