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目的:EB病毒表达六种核抗原(EBNA-1、EBNA-2、EBNA-3A、EBNA-3B、EBNA-3C、EBNA-LP),本课题通过实时定量PCR和Western blot技术检测正常人淋巴细胞,转化淋巴母细胞和诱发淋巴瘤中EBNAs的差异表达情况,为EB病毒与淋巴瘤的发生机制研究提供实验依据。方法:体外培养建立EBV转化的永生化淋巴细胞(淋巴母细胞系),同时复制体内EBV诱发淋巴瘤的动物模型。提取“正常人”淋巴细胞,转化淋巴母细胞,诱发淋巴瘤细胞三者的RNA和蛋白,应用实时定量PCR和Western blot方法,分别检测EBNAs基因在6例“正常人”淋巴细胞,6例转化淋巴细胞和3例诱发淋巴瘤中的表达情况。结果:成功复制诱发淋巴瘤动物模型,得到了6例“正常人”淋巴细胞,6例转化淋巴细胞和3例诱发淋巴瘤,检测了EBNA-1、EBNA-2、EBNA-3A、、EBNA-3B、EBNA-3C、EBNA-LP在6例“正常人”淋巴细胞,6例转化淋巴细胞和3例诱发淋巴瘤细胞,中的表达情况。EBNA-1基因在三种细胞中均表达,在转化细胞比在正常人淋巴细胞中的表达上调15796倍,(P<0.05),差异有统计学意义;在诱发淋巴瘤细胞中的表达比在正常人淋巴细胞中的表达上调11683倍,(P<0.05),差异有统计学意义;在转化细胞中的表达比在诱发淋巴瘤细胞中的表达上调18.21倍,(P<0.05),差异有统计学意义。Western blot结果显示,与正常人淋巴细胞组相比,EBNA-1在转化细胞组和诱发淋巴瘤细胞组中的蛋白表达明显升高,(P<0.05),差异有统计学意义; EBNA-1在转化细胞中的蛋白表达明显高于诱发淋巴瘤细胞组,(P<0.05),差异有统计学意义。EBNA-2基因在正常人淋巴细胞阴性表达,在转化细胞和诱发淋巴瘤细胞中阳性表达,在转化细胞中与在诱发淋巴瘤细胞中的表达差异无统计学意义,(P>0.05)。EBNA-3A基因在三种细胞中均表达,在转化细胞比在正常人淋巴细胞中的表达上调1341倍,(P<0.05),差异有统计学意义;在诱发淋巴瘤细胞中的表达比在正常人淋巴细胞中的表达上调1154倍,(P<0.05),差异有统计学意义;在转化细胞中与在诱发淋巴瘤细胞中的表达差异无统计学意义,(P>0.05)。EBNA-3B基因在正常人淋巴细胞阴性表达,在转化细胞和诱发淋巴瘤细胞中阳性表达,在转化细胞中与在诱发淋巴瘤细胞中的表达差异无统计学意义,(P>0.05)。EBNA-3C基因在正常人淋巴细胞阴性表达,在转化细胞和诱发淋巴瘤细胞中阳性表达,在转化细胞中与在诱发淋巴瘤细胞中的表达差异无统计学意义,(P>0.05)。EBNA-LP基因在正常人淋巴细胞阴性表达,在转化细胞和诱发淋巴瘤细胞中阳性表达,在转化细胞中与在诱发淋巴瘤细胞中的表达差异无统计学意义,(P>0.05)。结论: 1. EBNA-1在转化淋巴母细胞和诱发淋巴瘤细胞中表达均上调,并且在转化细胞中的表达高于其在诱发淋巴瘤细胞中的表达。2. EBNA-2在正常人淋巴细胞不表达,在转化细胞和诱发淋巴瘤细胞中阳性表达。3. EBNA-3A在转化淋巴母细胞和诱发淋巴瘤细胞中表达均上调,但在转化细胞中和在诱发淋巴瘤细胞中的表达无显著性差异。EBNA-3B和EBNA-3C在正常人淋巴细胞不表达,在转化细胞和诱发淋巴瘤细胞中阳性表达。4. EBNA-LP在正常人淋巴细胞不表达,在转化细胞和诱发淋巴瘤细胞中阳性表达。