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目的:探讨过表达ATF4对Warburg效应蛋白PKM2表达影响及对人肝癌HepG2细胞凋亡影响的研究,为今后肝癌的治疗提供新思路。方法:本实验分组如下:空白对照组;转染空质粒组;转染ATF4质粒组。构建ATF4质粒,采用脂质体介导瞬时转染的方法进行实验。使用荧光显微镜检测各组HepG2细胞转染率,同时采用Western-Blot检测质粒转染前后ATF4蛋白表达量的变化。经过观察,质粒转染48h时,转染率最高,采用L-乳酸检测试剂盒检测HepG2细胞外乳酸含量;Western-Blot检测Warburg效应蛋白PKM2的表达情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:1.瞬时转染结果表明,荧光显微镜下观察可见视野中的HepG2细胞大部分可见绿色荧光,计算转染率约75%。2.Western-Blot检测ATF4结果显示,与转染空质粒组及空白对照组相比,转染ATF4质粒组的HepG2细胞ATF4蛋白的表达量明显增加(P<0.05)。3.乳酸检测结果显示,与转染空质粒组(10.21±1.53)mmol/L及空白对照组(10.17±1.25)mmol/L相比,转染ATF4质粒组HepG2细胞外乳酸含量(5.63±1.05)mmol/L明显减少(P<0.05)。4.Western-Blot检测PKM2结果显示,与转染空质粒组及空白对照组相比,转染ATF4质粒组的HepG2细胞PKM2蛋白的表达量显著减少(P<0.05)。5.流式细胞仪检测结果显示:与转染空质粒组(17.80±0.84)%及空白对照组(17.62±0.83%)相比,转染ATF4质粒组HepG2细胞凋亡率(43.76±5.61)%明显增加(P<0.05)。结论:过表达ATF4促进肝癌细胞HepG2的凋亡,可能与下调Warburg效应蛋白PKM2的表达,抑制Warburg效应有关。