TK-MCP-1融合基因对免疫重建SCID小鼠腹腔卵巢癌治疗作用的实验研究

来源 :山东大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a20090907
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第一部分 免疫重建SCID小鼠腹腔卵巢癌模型的建立及评价 目的:建立免疫重建SCID小鼠的荷人卵巢癌腹腔移植瘤模型,为卵巢癌生物学行为的观察和生物学治疗手段的探索提供可靠的研究载体。 方法:常规培养SKOV3肿瘤细胞,分别用高滴度产毒细胞的逆转录病毒上清(分别含pLXSN、pLXSN/TK、pLXSN/MCP-1或pLXSN/TK-MCP-1的病毒颗粒)感染SKOV3肿瘤细胞并用G418筛选。收获各组细胞,提取总RNA,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中HSV-TK和(或)MCP-1基因表达情况。用酶联免疫吸附方法(ELISA)测定C.B17/SCID小鼠血清中鼠IgG含量,检验是否存在免疫渗漏。Ficoll密度法分离人体外周血单个核细胞,以腹腔注射方式行免疫重建及瘤细胞接种,根据接种瘤细胞的不同将人化SCID小鼠分为TK-MCP-1组、MCP-1组、TK组,并以接种SKOV3/neo细胞株的人化SCID小鼠作为对照组。ELISA法检测SCID小鼠血清中人IgG抗体水平,验证免疫重建。SCID小鼠种瘤后,观察荷瘤鼠成瘤情况、生物学特性及组织学特性。 结果:以高滴度的病毒上清感染SKOV3细胞,经G418筛选后建立稳定感染细胞SKOV3/neo、SKOV3/HSV-TK、SKOV3/MCP-1和SKOV3/TK-MCP-1;SKOV3/HSV-TK、SKOV3/MCP-1和SKOV3/TK-MCP-1细胞株中HSV-TK和
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