西红花苷对肾纤维化大鼠ATF6调控XBP1转录作用的研究

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目前,慢性肾病已严重威胁人体健康,肾小管间质纤维化最终发展为终末期肾病,且发病率逐年升高,中药及其有效提取物、中药复方在治疗肾间质纤维化方面并没有得到充分地利用,中药具有良好的抗肾间质纤维化应用前景。本文研究西红花苷对肾间质纤维化大鼠激活转录因子6(ATF6)调控转录因子X盒结合蛋白1(XBP1)作用的机理。通过单侧输尿管梗阻建立大鼠肾间质纤维化的动物模型。将大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利组、西红花苷高中低剂量组。于造模后第14天处死大鼠,测定肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);观察大鼠左侧肾脏水肿程度;采用HE染色评定肾小管损伤指数,肾间质纤维化程度;采用Masson染色法对肾间质胶原面积进行半定量分析;采用TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡;采用Western Blot免疫印迹法检测各组大鼠ATF6、XBP1蛋白表达水平。结果表明术后14天,各治疗组与模型组比较,Scr、BUN的水平均明显降低(P<0.01,),西红花苷高剂量组与依那普利组比较,降低Scr、BUN作用明显(P<0.05);各治疗组与模型组相比,均能减小肾重(P<0.01,P<0.05),西红花苷高剂量组与依那普利组比较能减轻肾重(P<0.05);西红花苷高剂量组与依那普利组比较,HE染色肾小管损伤作用有差异(P<0.05);与模型组相比,Masson染色肾间质胶原相对面积明显减小(P<0.01),肾纤维化程度明显降低,西红花苷高剂量组与依那普利组比较,有显著差异(P<0.05);通过TUNEL实验发现,模型组与假手术组相比,凋亡细胞阳性表达差异显著(P<0.01),西红花苷高剂量组与依那普利组比较,肾小管上皮细胞凋亡指数明显下降(P<0.05);Western免疫印迹法对ATF6和XBP1蛋白表达水平的检测发现,与假手术组比较,模型组中蛋白表达明显升高(P<0.01),各治疗组与模型组比较,均能有效降低ATF6和XBP1蛋白的表达(P<0.01),且西红花苷高剂量组明显优于依那普利阳性药组(P<0.05)。总之,西红花苷能够保护肾间质纤维化大鼠肾功能;减轻单侧输尿管梗阻大鼠肾积水,改善肾小管上皮细胞空泡,纤维化,肾小管扩张,减少肾脏间质胶原面积的形成,降低肾小管上皮细胞凋亡,减少未折叠蛋白反应中ATF6和XBP1的蛋白表达水平,抑制纤维化形成。
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