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目的探讨基质细胞衍生因子-1(Stromal cell-derived-1,SDF-1)在BMSCs向骨折部位定向迁移及骨折修复过程的作用,为将来通过调控BMSCs的定向迁移来促进骨折愈合提供依据。方法:(1)经密度离心法从GFP转基因C57小鼠骨髓内分离培养BMSCs。并通过向成骨细胞、脂肪细胞诱导证明其具有多向分化能力,利用流式细胞仪检测其细胞表面分子CD44和CD34的表达。(2)4周龄雌性C57小鼠用10Gy的X线照射后,将1000个携带GFP的BMSCs与雄性小鼠的骨髓非贴壁细胞按1:1 000制成混合细胞悬液后从其尾静脉内注入,建立嵌合体动物模型。通过激光共聚焦显微镜检测嵌合体GFP阳性细胞在骨髓细胞中的比例。(3)嵌合体建立后,将135只嵌合体小鼠随机分为A、B、C组。3组均建立左胫骨骨折模型,A组为空白对照组,骨折局部仅加入ECM; B组:100ng/mlSDF-1+ECM;C组: 2ug/mlSDF-1抗体+ECM,三组局部注射的总量相同,均为0.1ml。分别于术后第14、21,28天拍摄左下肢侧位X线片,拍片后处死,取骨折部位标本行组织学检查,于术后第1、3、7、14天利用激光共聚焦显微镜检测各组骨折端GFP阳性细胞的数量,并于术后28天取骨折标本的进行抗折力测试。结果(1)分离培养的BMSCs呈克隆样生长,经激光共聚焦显微镜检测表明它们均呈GFP阳性;经成骨诱导培养后出现钙沉积;经成脂肪诱导后形成脂肪滴。(2)嵌合体建立8周后,移植的细胞归巢至骨髓内,其中GFP阳性细胞比例为3.12±0.11%。(3)术后第1、3、7、14天各相应时相点,骨折端的BMSCs数量B组>A组>C组,有显著性差异(P<0.05);在术后14天、21天各相应时相点的骨痂量:B组>A组>C组,有显著性差异(P<0.05),在第28天,A组>B组>C组,有显著性差异(P<0.05);术后28天抗折力: B组>A组>C组,有显著性差异(P<0.05)。结论(1)通过密度离心法可以从GFP转基因C57小鼠骨髓内获取GFP阳性的BMSCs。(2)利用GFP阳性BMSCs与骨髓非贴壁细胞联合移植成功建立的C57小鼠嵌合体;(3)SDF-1可以促进BMSCs向骨折端迁移,并对骨折愈合具有促进作用。