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本文研究了雌激素对多巴胺能神经元保护作用的体内和体外实验,全文分为两部分;
第一部分:观察雌激素对多巴胺能神经元是否具有保护作用。
研究方法:去卵巢(OVX)大鼠分别给予生理盐水(NS)和苯甲酸雌二醇(EB)处理,1周后用6-羟基多巴胺(6-OHDA)造模,造模2周后灌注取材。利用免疫组化法观察黑质内多巴胺能神经元的数量、纹状体中多巴胺能神经元末稍的变化;用TUNEL法观察黑质凋亡细胞的数目并对纹状体中胆碱能神经元进行乙酰胆碱酯酶(AchE)染色,观察其退变情况。
研究结果:和NS组相比,EB组多巴胺能神经元数量多、凋亡细胞数少(P<0.05);NS组多巴胺能神经元末稍减少60%左右,胆碱能神经元退变明显。
研究结论:雌激素对多巴胺能神经元具有保护作用,可能与抑制神经元凋亡有关。
第二部分:探讨在离体的细胞培养物中,雌激素对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导的多巴胺能神经元损伤是否具有保护作用。
研究方法:将培养的多巴胺能神经元分为如下三组:空白对照组、E2+MPP+组、MPP+组。用免疫组织细胞化学法观察培养物中TH阳性神经元的生长状况、观察神经元中微管相关蛋白-2(MAP-2)的染色情况。用TUNEL法检测凋亡细胞的数目,并用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞活力和代谢状态。
研究结果:与空白对照组或E2+MPP+组相比,MPP+组TH阳性神经元数量少、TUNEL阳性细胞多、细胞活力差,MAP-2阳性染色减少约40%左右。而E2+MPP+组与空白对照组相比,差异无统计学意义。
研究结论:雌激素对多巴胺能神经元具有保护作用,可能与抑制神经元凋亡有关。