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目的:研究DOK1基因在糖尿病前期以及糖尿病发病进程中的作用和机制。方法:(1)在动物水平,将小鼠分为对照组,糖尿病前期组和糖尿病组三组,高脂饮食方法建立C57/BL小鼠糖尿病前期模型,高脂饮食联合STZ注射方法建立C57/BL小鼠2型糖尿病模型,当小鼠血糖达到糖尿病前期和糖尿病诊断标准时,应用qRT-PCR方法检测DOK1在各组小鼠心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、胰腺、脂肪、结肠九个组织中的表达情况。(2)在细胞水平,用棕榈酸处理建立BRL-3A细胞、3T3-L1细胞、C2C12细胞胰岛素抵抗模型,Western blotting方法检测DOK1、IRSI、IRSII、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、SREBPIc蛋白的表达情况。(3)携带DOK1的腺病毒转入BRL-3A细胞、3T3-L1细胞、C2C12细胞将DOK1高表达,通过CCK-8法检测细胞增殖能力、流式细胞仪法检测腺病毒的最佳转染情况、Western blotting法检测胰岛素信号通路IRS1、IRS1、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、SREBPIc等蛋白的表达情况。结果:(1)qRT-PCR结果显示DOK1在糖尿病前期组和糖尿病组的表达低于正常小鼠组(P<0.05)。(2)在细胞胰岛素抵抗模型中,DOK1蛋白的表达低于正常细胞对照组(P<0.05),与对照组相比,胰岛素信号通路蛋白IRSI和IRSII表达无变化(P>0.05),p-PI3K和PI3K比值无变化(P>0.05),p-AKT和AKT比值下调(P<0.05),SREBPIc蛋白表达明显上调(P<0.05)。(3)CCK-8结果显示腺病毒转染BRL-3A细胞、3T3-L1细胞、C2C12细胞上调DOK1会随着腺病毒浓度增大和转染时间的延长会影响细胞的增值能力,以细胞生存率和病毒转染复数两个指标通过ROC曲线分析三株细胞的最佳MOI值和病毒转染时间。BRL-3A细胞的最佳条件是:MOI=60,转染48小时。3T3-L1细胞的最佳条件是:MOI=100,转染48小时。C2C12细胞的最佳条件是:MOI=150,转染48小时。与对照组相比,DOK1上调后胰岛素信号通路蛋白IRSI和IRSII表达无变化(P>0.05)、PI3K和p-PI3K比值无变化(P>0.05)、AKT和p-AKT比值上调(P<0.05),SREBPIc蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:DOK1基因可能参与糖尿病前期到糖尿病的整个发病进程。DOK1基因可能通过DOK1/AKT/SREBPIc信号通路影响糖尿病的发病机制。