HMGB1和TLR4在胎膜早破患者胎膜胎盘组织中的表达及意义

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目的:胎膜早破(premature rupture of membrane,PROM)是围产期常见的并发症,且发生率呈逐年上升趋势,威胁母儿健康、影响围产儿质量,常引起早产、孕产妇及胎儿新生儿感染、胎盘早剥、胎儿新生儿变形或死亡、新生儿败血症等并发症。国内外专家学者对胎膜早破做了大量研究,但其发病机制仍不明确,所以研究胎膜自发性破裂的发病机制至关迫切。高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1,HMGB1)是非典型的非组蛋白,因其在电泳凝胶上迁移率高而定名。在细胞外通过与其特异性受体结合,介导炎症反应的发生发展。Toll样受体4(toll-like receport4,TLR4)是激活细胞分泌相关炎性介质的受体,通过识别外源性/内源性信号,启动炎症信号途径,进而释放大量炎症介质,诱发损伤效应。本研究通过检测HMGB1和TLR4在胎膜早破孕妇、正常晚孕孕妇胎膜胎盘组织中的表达,探讨两者在胎膜早破发生发展过程中的作用机制及其关系,可能为胎膜早破的预防及治疗提供新的靶点。材料和方法:1.研究对象:选取2015年5月-10月于郑州大学第三附属医院剖宫产的足月胎膜早破孕妇30例(实验组),另随机选取同期行剖宫产的正常足月孕妇30例(对照组)。2.实验方法:(1)采用免疫组织化学法检测两组胎膜胎盘组织中HMGB1和TLR4蛋白的定位与表达。(2)采用实时荧光定量PCR法检测两组胎膜胎盘组织中HMGB1和TLR4的mRNA的相对表达量。3.统计学方法:采用SPSS21.0统计软件对全部数据进行统计学分析。计量资料用均数±标准差(?x±s)表示,符合正态性分布的计量资料组间比较采用两组独立样本t检验,不符合正态性分布的计量资料采用非参数检验,两变量的相关分析采用Person相关分析法。以P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.两组孕妇基本资料比较:两组孕妇的年龄、孕周、产时BMI和新生儿体重均无统计学意义(P>0.05)。2.两组胎膜胎盘组织中HMGB1和TLR4蛋白表达水平比较:两组胎膜胎盘组织中均有不同程度的HMGB1和TLR4表达,HMGB1主要定位于羊膜上皮细胞和间质细胞的胞核中,胎盘滋养细胞、血管内皮细胞胞核及胞质中;TLR4主要定位于羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞中,胎盘滋养细胞、血管内皮细胞胞质及胞膜中。实验组胎膜组织中HMGB1、TLR4蛋白表达水平分别为0.306±0.031、0.507±0.032,对照组分别为0.124±0.014、0.186±0.008,两组相比差异有统计学意义(P<0.05);实验组胎盘组织中HMGB1、TLR4蛋白表达水平分别为0.179±0.014、0.299±0.023,对照组分别为0.074±0.002、0.121±0.002,实验组蛋白表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.两组胎膜胎盘组织中HMGB1和TLR4的mRNA相对表达量比较:两组胎膜胎盘组织中均可检测到HMGB1、TLR4mRNA的表达,实验组胎膜组织中HMGB1和TLR4的mRNA相对表达量分别为2.356±0.046、1.155±0.013,对照组分别为1.115±0.011、0.523±0.035,实验组比对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);实验组胎盘组织中HMGB1和TLR4的mRNA相对表达量分别为1.332±0.036、1.291±0.020,对照组分别为0.465±0.038、0.420±0.034,实验组和对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。4.实验组HMGB1和TLR4表达的相关性分析:实验组胎膜组织中HMGB1和TLR4mRNA的相对表达量呈正相关(r1=0.436,P1=0.016);实验组胎盘组织中HMGB1和TLR4mRNA的相对表达量呈正相关(r2=0.447,P2=0.013)。结论:1.胎膜早破患者胎膜胎盘组织中HMGB1和TLR4的表达升高,说明HMGB1和TLR4可能参与了胎膜早破的发生发展。2.胎膜早破患者HMGB1和TLR4表达的相关性,提示二者可能通过某种机制共同参与胎膜早破的发病过程。
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