湖北省禾谷孢囊线虫遗传多样性及其生活世代研究

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禾谷孢囊线虫(Cereal Cyst Nematode, CCN)是危害禾谷类作物的重要病原,严重威胁我国小麦主产区的小麦产量和品质。本研究主要调查CCN在湖北省的分布情况;利用限制性片段长度多态性(RFLP)技术来分析湖北省襄阳市牛首镇CCN群体的核糖体DNA的内转录间隔区(rDNA-ITS);利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析了襄阳市牛首镇CCN群体的遗传多样性;使用次氯酸钠-酸性品红染色法来调查襄阳市牛首镇CCN群体的生活世代变化。获得的主要结果如下:1.通过试验发现目前在襄阳市、钟祥市、天门市、汉川市、潜江市有CCN分布,其中襄阳市牛首镇CCN分布量最多,平均每100m1土样中含孢囊数约20.61个,并且平均每个孢囊中所含的实卵数也最多,约为140.31个。其他各地CCN的分布量都较少。2.用7种限制性内切酶Alu I、Rsa I、Hinf I、Pst I、Taq I、Cfo I (Hha I)和Trul I (Mse I、Tru9 I)酶切襄阳市牛首镇CCN群体中10个样本的rDNA-ITS区,通过酶切图谱分析,发现襄阳市牛首镇CCN群体都属于“C”型群体。3.筛选出20个扩增稳定、带纹清晰的RAPD引物,对襄阳市牛首镇CCN群体中20个样本进行了遗传多样性分析,结果表明,RAPD谱带多态性为82.98%,具有较丰富的遗传多样性;利用NTSYS软件进行系统聚类分析表明,以相似系数为0.65阈值划分襄阳市牛首镇CCN群体较为合适,可将其20个样划分为2个遗传宗谱。4.利用次氯酸钠-酸性品红染色方法研究CCN在小麦根组织中的发育形态和数量的变化,研究结果发现二龄幼虫的侵染在小麦分蘖期和返青期都出现高峰;在小麦的抽穗期即有白雌虫露出根表,到扬花期达到高峰;通过其发育的进程发现,襄阳市牛首镇CCN群体完成整个生活世代约5个月。此研究结果为更好的防治此病提供了理论依据,并且对进一步的研究提供了思路。
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