【摘 要】
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随着石化能源需求量的日益增加,因石油生产、运输和使用不当导致的石油泄漏等问题愈发严重,造成了严重的土壤环境污染。石油污染土壤治理的技术有很多种,其中微生物治理技术因其绿色环保、无二次污染的优点而受到广泛关注。但是微生物治理技术还存在着以下问题:1)缺乏高效的修复菌株;2)外源菌株应用于土壤后修复效率不高等技术瓶颈问题,难以实现大规模工程应用。基于此,本研究以天津大港油田土壤为研究对象,从土壤中分离
【基金项目】
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天津市院市合作项目“石油污染土壤热强化-生化修复技术集成与应用示范”;
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随着石化能源需求量的日益增加,因石油生产、运输和使用不当导致的石油泄漏等问题愈发严重,造成了严重的土壤环境污染。石油污染土壤治理的技术有很多种,其中微生物治理技术因其绿色环保、无二次污染的优点而受到广泛关注。但是微生物治理技术还存在着以下问题:1)缺乏高效的修复菌株;2)外源菌株应用于土壤后修复效率不高等技术瓶颈问题,难以实现大规模工程应用。基于此,本研究以天津大港油田土壤为研究对象,从土壤中分离出了50株石油烃降解菌株,其中23株为高效石油烃降解菌,选择其中一株新型高效石油烃降解菌Falsochrobactrum sp.TDYN1进行深入研究,以期为高效石油烃降解菌修复石油污染土壤提供数据支持。本文针对该新型高效石油烃降解菌展开研究,主要通过16S r DNA测序、系统发育分析等实验研究其生物学分类;通过生长条件优化及生理生化实验研究其生物学特性;通过含油土壤修复实验探究其实际应用中的石油降解效率。本论文的主要研究结果总结如下:(1)石油降解实验筛选的23株高效石油烃降解菌,通过16S r DNA测序数据分析,发现了一个新的物种Falsochrobactrum sp.,该属的菌株具备高效的石油烃降解能力,7天的降解效率达到91-94%。针对最优降解效率的菌株TDYN1进行深入研究,并将TDYN1保藏到中国普通微生物菌株保藏中心(CGMCC)和中国典型培养物保藏中心(CCTCC),在美国国家生物技术信息中心(NCBI)上提交了16S r DNA基因序列。(2)TDYN1的生物学特性研究发现,第4-20小时为对数生长期。菌落在平板上呈条形分布,菌体为乳白色,菌体呈短棒状;革兰氏染色阴性。吲哚和产氨实验、过氧化氢酶和氧化酶检测均为阳性。葡萄糖和乳糖试验产酸,但不产气。其主要脂肪酸成分为C18.1N9C、C16.0、C18.0、C16.1和C17.0;极性脂类成分为二磷脂酰甘油(DPG)、磷脂酰单甲基乙醇胺(PME)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰甘油(PG)和磷脂酰胆碱(PE);呼吸醌成分为Co Q-10、Co Q-9和Co Q-8。(3)TDYN1的土壤应用实验研究中,扫描电镜结果观察到玉米秸秆生物炭对石油烃降解菌的固定效果较好。石油降解效率测定结果显示了添加生物炭和降解菌以及添加生物炭固定降解菌的两组都具有较强的降解效果,尤其是固定化菌剂的应用,降解25天土壤石油去除率高达38%。
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