论文部分内容阅读
目的:研究急性髓系白血病(AML)中Galectin-1基因的甲基化水平,探讨Galectin-1基因表达水平与启动子甲基化的关系。 方法:选取2014年1月-2015年12月在中南大学湘雅医院血液科治疗前AML骨髓54例、治疗后完全缓解AML骨髓8例和对照组骨髓35例,采用甲基化特异性 PCR(MS-PCR)技术检测 Galectin-1基因的甲基化状态。采用5-氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-2dC)处理不同类型的白血病细胞系:急性髓系白血病细胞株HL-60、Kasumi-1、THP-1;慢性髓性白血病细胞(CML)株K562后,MS-PCR检测Galectin-1基因甲基化状态,RT-PCR检测Galectin-1mRNA表达水平,western blot检测蛋白表达水平。 结果: (1) Galectin-1基因表达水平在 AML骨髓中明显低于对照组骨髓(0.35+0.09 VS0.87+0.22)(t=11.124,P=0.000);完全缓解AML骨髓中Galectin-1基因平均表达水平明显高于治疗前骨髓(0.79+0.21 VS0.33+0.11)(t=9.512,P=0.000)。 (2)AML骨髓Galectin-1基因甲基化阳性率为79.6%(43/54),对照组阳性率为17.1%(6/35), AML骨髓甲基化阳性率明显高于对照组(χ2=33.510,P=0.000);Galectin-1甲基化阳性率在治疗前AML骨髓为75%(6/8),而在完全缓解 AML骨髓为12.5﹪(1/8),两者之间的有显著性差异(χ2=6.349,P=0.012)。 (3)Galectin-1基因在三个AML细胞株的甲基化水平高于CML细胞株(P<0.01);Galectin-1的mRNA在三个AML细胞株中的表达水平明显低于CML细胞株(P<0.01);5-aza-2dC处理细胞后,AML细胞株中Galectin-1的mRNA表达水平明显增高(P<0.01),而 CML细胞株中 Galectin-1的mRNA表达水平无明显差异。 (4)Galectin-1蛋白表达水平在三个AML细胞株中明显低于CML细胞株(P<0.01);5-aza-2dC处理细胞后,Galectin-1蛋白表达水平在三个AML细胞株中明显增高(P<0.01)。 (5)5-aza-2dC处理细胞后,Galectin-1基因在三个 AML细胞株的甲基化水平明显下调(P<0.01)。 结论: (1)AML中Galectin-1基因由于启动子高甲基化而导致其表达下调。 (2)5-aza-2dC可以通过去甲基化作用促进Galectin-1基因和蛋白表达水平增加。