结直肠癌新型分子诊断标志物的筛选和鉴定

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wk1990
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第一部分:  目的:本研究旨在筛选和鉴定出适用于结直肠癌诊断的新型肿瘤分子标志物,以指导临床的诊断和治疗。  方法:运用免疫组织化学(IHC)、实时定量PCR(RT-PCR)以及免疫印迹(WB)的方法,研究基质重塑关联蛋白5(MXRA5)、脂肪细胞增强结合蛋白1(AEBP1)、胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)在结直肠癌及其对应的正常组织和腺瘤中的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系。  结果:MXRA5、AEBP1阳性染色主要出现在细胞浆中。结直肠正常组织呈阴性或者弱阳性染色,腺瘤中呈现弱阳性或者阳性染色,而在肿瘤中呈现阳性或者强阳性染色,其免疫评分在三者之间有明显差异(P<0.05),而且随着疾病的进展,免疫评分逐渐增强;另外,MXRA5的阳性表达与肿瘤的分期和大网膜转移明显相关(P<0.05);AEBP1的阳性表达与肿瘤的分期和浸润深度明显相关(P<0.05),但是,在基因水平上MXRA5和AEBP1的表达在三者之间没有发现明显差异(P>0.05)。  CTHRC1的阳性染色主要出现在细胞浆中。结直肠正常组织呈阴性或者弱阳性染色,而在肿瘤中呈现阳性或者强阳性染色,其免疫评分在两者之间有明显差异(P<0.05),另外,CTHRC1的阳性表达与肿瘤的分期明显相关(P<0.05);在基因水平上,CTHRC1在肿瘤中明显高表达(P<0.05)。  结论:我们的研究结果证实了MXRA5、AEBP1和CTHRC1在肠癌组织中存在异常表达,并且MXRA5可能是结直肠癌早期诊断或者大网膜转移的肿瘤标志物;AEBP1可能是结直肠癌早期诊断和肿瘤浸润深度的肿瘤标志物;CTHRC1可能在结直肠癌侵袭转移中发挥重要作用。  第二部分:  目的:分析谷胱甘肽巯基转移酶(glutathione S-transferase,GST)、nm23、细胞角蛋白7(cytokeratin7,CK7)在结直肠黏液腺癌及非黏液腺癌组织中的表达情况,并探讨其与临床病理特征的关系。  方法:选取在上海交通大学医学院附属新华医院结直肠癌肛门疾病外科行手术治疗的134例结直肠黏液腺癌标本和646例结直肠非黏液腺癌标本,分析了两组之间临床病理特征的差异,并运用免疫组化技术对蛋白GST、nm23、CK7在结直肠黏液腺癌及非黏液腺癌组织中的表达情况以及与临床病理特征的关系进行了分析。  结果:蛋白GST和nm23在结直肠黏液腺癌组织中的阳性表达率分别为52.3%和57.8%,明显低于非黏液腺癌组织中的阳性率(64.7%,73.0%;均P<0.05),而蛋白CK7在黏液腺癌组织中的阳性表达率明显高于非黏液腺癌组织中的阳性率(27.5%vs18.4%,P<0.05);蛋白GST的表达水平与黏液腺癌的较低分化程度和较多淋巴结转移相关(P<0.05),蛋白nm23和CK7的表达与黏液腺癌的临床特征无明显相关性。  结论:蛋白GST、nm23、CK7在结直肠黏液腺癌及非黏液腺癌组织中存在异常表达,蛋白GST有可能成为临床上检测黏液腺癌淋巴转移和分化程度的生物学指标。
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