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目的随着当代社会经济的高速发展,育龄人群所承受的社会压力剧增,婚龄及生育年龄推迟,加之我国二孩政策全面开放,原发或继发不孕症呈上升趋势,辅助生殖技术是帮助那些不孕不育患者成功受孕的有效手段,而且越来越成熟,但成功率有限。成功的受孕除了有优质的胚胎形成外,良好的子宫内膜容受性也是必不可少的因素。miRNA作为近些年来新发现的一种非编码小RNA,在转录或转录后水平调控着子宫内膜容受性相关基因的表达,参与胚胎着床与子宫内膜蜕膜化的过程。根据课题组前期对大鼠围种植期子宫内膜外泌体的miRNA差异表达谱,本文旨在探讨miR-155和miR-146a在早孕胚胎着床过程中的表达规律及其作用探讨。方法第一部分hsa-miR-155和hsa-miR-146a在正常女性分泌中期内膜和正常早孕蜕膜中表达变化根据纳入标准和排除标准收集我院妇产科门诊早孕行人工流产患者的蜕膜组织及生育力正常志愿者提供的分泌中期子宫内膜组织,病理切片染色从形态上区分着床前后子宫内膜变化,提取相应组织中RNA后,采用miRNA探针法行实时荧光定量核酸扩增检测系统,检测两组患者内膜组织中hsa-miR-155和hsa-miR-146a具体表达量。分析人的子宫内膜在蜕膜化过程中这两种miRNA的改变。第二部分mmu-miR-155和mmu-miR-146a在小鼠早孕期子宫内膜表达规律并探讨对胚胎着床的影响将具有规律动情周期的8周龄雌性ICR小鼠与同品系的处于生育期雄鼠合笼,收集孕1、4、5、6天(D1、D4、D5、D6)的子宫内膜组织,同时收集孕D5天小鼠胚胎着床点与非着床点的子宫组织,苏木精-伊红染色法从形态上观察小鼠早孕期间子宫内膜的改变;采用实时荧光定量核酸扩增检测系统获取早孕不同天数子宫内膜组织中mmu-miR-155和mmu-miR-146a表达规律;根据前期实验结果,将具有规律动情周期的8周龄ICR小鼠与同品系的处于生育期雄鼠合笼,于孕D3时,从小鼠背部行手术进入腹腔,靠近卵巢的宫角侧注射mmu-miR-155 agomir或者mmu-miR-146a agomir,对侧注射NC agomir作为自身对照,在孕D8天时处死小鼠,计数胚胎着床数目的改变,观察对胚胎着床的影响。结果1、临床实验中发现正常早孕蜕膜组织中hsa-miR-155和hsa-miR-146a较育龄期女性分泌中期子宫内膜组织明显下降,差异具有统计学意义(p<0.05)。2、随着小鼠孕天数的改变,从D1、D4、D5到D6,蜕膜化改变逐渐进展,子宫内膜组织中mmu-miR-155和mmu-miR-146a的表达量逐渐下降,胚胎着床前后二者也显著下降,并且在小鼠孕D5天的胚胎着床点的子宫内膜组织较非着床点的子宫内膜组织中mmu-miR-155和mmu-miR-146a表达也明显下降,所有差异均具有统计学意义(p<0.05)。3、小鼠宫角注射mmu-miR-155 agomir或者mmu-miR-146a agomir后,实验侧子宫中胚胎着床数目较NC agomir均显著性减少(p<0.05)。结论在早孕胚胎着床过程的子宫内膜组织中,随着妊娠时间的增加,miR-155和miR-146a表达均呈显著下降趋势,可能是通过上调相关靶基因影响蜕膜化进展,从而参与胚胎着床过程,为研究胚胎植入的过程提供了一个新靶点。