基于Caspase-7表达探讨活血利水法对EMS大鼠异位内膜细胞凋亡的影响

来源 :陕西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chu573346412
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目的:通过建立子宫内膜异位症EMS大鼠模型,给予活血利水法代表方桂枝茯苓胶囊中药干预,免疫组化法检测内膜caspase-7表达,TUNEL法检测细胞凋亡,观察桂枝茯苓胶囊对EMS大鼠异位内膜细胞凋亡的影响,探讨桂枝茯苓胶囊治疗EMS效应机制。  方法:健康雌性SD大鼠140只,逐只建立动情周期档案,选取动情周期规律的大鼠130只纳入实验,15只为空白对照组,15只为假手术组,其余100只于大鼠动情期,行自体移植法手术,建立EMS大鼠模型。术后肌注庆大霉素预防感染。肌注苯甲酸雌二醇促进异位内膜生长。术后4周,所有造模大鼠剖腹观察成模情况及移植物外观变化。选取造模成功的大鼠,随机分为六组,即模型组、桂枝茯苓胶囊高、中、低剂量组、散结镇痛胶囊组、米非司酮组(以下分别简称为模型组、桂高组、桂中组、桂低组、散结组、米非组)。药物干预4周,处死大鼠,再次开腹观察移植物变化情况,剥离移植组织制作标本,观察细胞凋亡情况。  结果:1.本实验进行造模的150只SD雌性大鼠,造模成功90只,造模成功率85.71%。2.二次开腹时各组大鼠异位病灶外观体积增长比较差别不明显;三次开腹时模型组异位病灶体积较二次开腹时明显增大;各用药组大鼠异位病灶外观体积均较模型组减小。3.组织形态学观察:模型组异位内膜增生,腺体数目多,腺腔大,腺上皮部分呈复层排列,上皮细胞呈高柱状或立方状。各用药组异位内膜腺体萎缩,数目减少,细胞甚至扁平状松散排列,间质细胞减少甚至缺如,周围血管减少。其中,米非组、桂高组萎缩最明显。4.各组大鼠移植物外观变化:模型组异位病灶肉眼可见体积明显增大,呈透明囊状、壁薄、内含清亮液体。盆腔粘连严重,不易分离;各用药组中桂高组肉眼可见异位病灶体积缩小明显,仅膜性粘连,容易分离。米非组异位病灶变化情况大体观察与桂高组相似,但盆腔粘连较严重,难以分离。5.模型组异位内膜组织中caspase-7低水平表达,各用药组均能不同程度的上调caspase-7表达,以桂高组和米非组最明显。6.凋亡率AI比较:空白组及假手术组正常子宫内膜均存在细胞凋亡,模型组异位内膜AI明显降低(P<0.01),用药后各组异位内膜AI均不同程度的升高。与模型组比较,桂高组、桂中组、米非组AI差异均存在统计学意义(P<0.05)。米非组与桂高组AI比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组均高于桂中组(P>0.05),也高于桂低组及散结组(P<0.05);散结组与桂低组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。  结论:1.桂枝茯苓胶囊可缩小异位病灶体积,促进其萎缩吸收,抑制生长,改善盆腔粘连,改善病理变化,抑制EMS病情发展,其中以桂高组最为明显。2.活血利水法代表方桂枝茯苓胶囊提高了caspase-7的表达,使异位内膜细胞凋亡能力增强,促进其萎缩。因此认为桂枝茯苓胶囊治疗EMS的疗效机制,可能与诱导异位内膜细胞凋亡密切相关,以方测证,进一步证实了血水同病乃EMS病机关键这一理论。
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