精元康胶囊对骨髓抑制小鼠FN和LN的影响

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目的:观察精元康胶囊对骨髓抑制小鼠股骨细胞外基质纤维粘连蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的影响,探讨精元康胶囊改善化疗药物致骨髓抑制的作用机制。方法:选用雄性昆明种小鼠56只,鼠龄为6~8周,体重18~22g,将小鼠称重后随机分为7组(正常组、模型组、贞芪扶正胶囊组、利可君片组、精元康胶囊低剂量组、精元康胶囊中剂量组、精元康胶囊高剂量组),每组8只。第1~3天每日上午,正常组腹腔注射等容积生理盐水,其余各用药组及模型组小鼠腹腔注射环磷酰胺100mg/kg。第1~7天每日下午,正常组、模型组用0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)20ml/kg灌胃,贞芪扶正胶囊组(以下简称贞芪扶正组)用贞芪扶正胶囊混悬液3mg/20ml/kg灌胃,利可君片组(以下简称利可君组)用利可君片悬浮液32mg/20ml/kg灌胃,精元康胶囊低剂量组(以下简称精低组)用精元康胶囊混悬液2g/20ml/kg灌胃,精元康胶囊中剂量组(以下简称精中组)用精元康胶囊混悬液3g/20ml/kg灌胃,精元康胶囊高剂量组(以下简称精高组)用精元康胶囊混悬液4g/20ml/kg灌胃。在小鼠给药或生理盐水7d后24h(造模后第8天)进行取材。将各组小鼠脱颈处死,并取出左侧股骨,置于福尔马林中固定3d,经脱钙3w,然后按常规方法脱水、透明、浸蜡、包埋,切片(3μm)。按免疫组化(SABC)法说明书操作,设立阴性对照,检测小鼠股骨LN和FN表达的变化;取出右侧股骨,在超净台下取出骨髓细胞,制备骨髓细胞悬液。取部分骨髓细胞悬液,按照试剂盒说明书,进行骨髓FNmRNADE和LNmRNA检测。结果1免疫组化实验结果显示,与模型组相比,各药物组均能明显的提高层粘连蛋白和纤维粘连蛋白的表达,其中精元康高胶囊组优于利可君片对照组、贞芪扶正对照组。2PCR法实验结果显示,与模型组比较,各药物组均可上调FNmRNA和LNmRNA基因表达水平,其中精元康高、中剂量组效果明显优于其他组别。结论精元康胶囊可明显改善骨髓抑制小鼠造血微环境细胞形态学,可能滴通过增加骨髓细胞外基质FN和LN表达,促进骨髓抑制小鼠LNmRNA和FNmRNA基因表达,提升骨髓细胞外基质蛋白(层粘连蛋白和纤维连接蛋白)的活性,促进造血微环境的修复,从而达到恢复和重建造血功能之目的。
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