瑞舒伐他订对大鼠脑出血后的Caspase-3,-7和c-IAP-1表达变化影响的研究

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目的:通过观察在瑞舒伐他汀干预下大鼠实验性脑出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)血肿周围脑组织中半胱氨酸蛋白酶3(cysteinylaspartate specific proteinases 3,Caspase-3)、半胱氨酸蛋白酶7(cysteinylaspartate specific proteinases 7,Caspase-7)和凋亡抑制蛋白1(cellular inhibitor of apoptosis proteins 1,c-IAP-1)的表达变化,探讨瑞舒伐他汀在脑出血发生后可能出现的神经保护作用及其机制,对临床用药起到一定指导作用。方法:(1)将60只SD大鼠按照随机分组的方法分为假手术组(A组,20只),脑出血组(B组,20只),瑞舒伐他汀干预组(C组,20只)。每组分成6h、24h、72h、5d四个时间点,每个时间点使用5只大鼠进行造模并实验。采用自体凝固血注入右侧尾状核法建立脑出血模型。(2)采用Garcia法对三组大鼠术后4个时间点分别进行神经缺损评分。(3)免疫组化法对三组大鼠血肿周围脑组织切片染色并在显微镜下观察分析。(4)RT-qPCR技术测定三组大鼠脑出血术后4个时间点血肿周围脑组织Caspase-3,-7及c-IAP-1表达状况。结果:(1)Garcia评分评估发现6小时时间点脑出血组和瑞舒伐他汀干预组相比差异无统计学意义,其余三个时间点瑞舒伐他汀干预组(C组)神经缺损情况较脑出血组(B组)减轻,P<0.05,有统计学意义。两组均在72h神经缺损症状达到峰值,之后症状缓解。假手术组(A组)与其余两组在术后4个时间点相比发现假手术组(A组)神经缺损较轻,神经功能远高于其余两组,差异均有统计学意义。(2)免疫组化法染色后显微镜下可观察到假手术组(A组)4个时间点脑出血后c-IAP-1和Caspase-3,-7阳性细胞少量表达,脑出血组(B组)和瑞舒伐他汀干预组(C组)较假手术组(A组)每个时间点阳性细胞均出现显著的增高。除脑出血后6小时这一时间点外,其余各个时间点的瑞舒伐他汀干预组(C组)要比脑出血模型组(B组)c-IAP-1阳性细胞表达增多,Caspase-3,-7阳性细胞表达减少。瑞舒伐他汀能降低Caspase-3,-7及提高c-IAP-1水平(3)RT-qPCR法显示,假手术组组与脑出血模型组和瑞舒伐他汀组组术后各个时间点相比c-IAP-1及Caspase-3,-7表达水平低。6小时时间点脑出血组和瑞舒伐他汀干预组相比差异无统计学意义,其余时间点之间脑出血组和瑞舒伐他汀干预组相比,c-IAP-1表达降低,Caspase-3,-7表达增高,差异有统计学意义。结论:(1)瑞舒伐他汀可以降低脑出血后神经功能缺损症状。(2)瑞舒伐他汀能够抑制Caspase-3和Caspase-7活化,进而提高c-IAP-1的表达,c-IAP-1反作用于Caspase-3和Caspase-7,从而进一步抑制Caspase-3和Caspase-7表达。提示瑞舒伐他汀能够降低由细胞凋亡影响引起的继发性的脑损伤,对神经功能起到一定的保护作用。
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