论文部分内容阅读
目的 近年来人们对研究CIN(宫颈上皮内瘤样病变)中细胞凋亡所扮演的角色很感兴趣，并认识到启动及调节凋亡的机制在决定何种CIN病变有可能进展为浸润癌时的重要价值。目前了解比较深入，较为公认的是bcl-2基因及其相关蛋白与凋亡的关系。本实验通过免疫组化的方法检测bcl-2、bax、caspase-3蛋白在正常宫颈上皮、CIN以及宫颈癌中的表达情况来研究bcl-2家族基因对凋亡的调节情况以及他们三者与疾病进展的关系。 方法 检测对象为中国医科大学附属第一医院2000-2003年手术及宫颈活检组织、LEEP刀手术标本蜡块79例，患者年龄21-56岁，平均年龄41.64±2.86岁，其中正常宫颈组织(NE)17例，宫颈上皮内瘤样病变—低度(CIN-L)21例，宫颈上皮内瘤样病变—高度(CIN-H)19例，宫颈浸润鳞癌组织(SCC)22例。凋亡相关基因bcl-2、bax及caspase-3蛋白的表达采用单克隆抗体免疫组化法。所有标本均经10％福尔马林固定，常规石蜡包埋，连续切片厚3-5μm，主要试剂兔抗人bcl-2、bax、caspase-3蛋白单克隆抗体。bcl-2、bax、caspase-3蛋白表达均定位于细胞浆，阳性细胞数≧10％判定为蛋白表达阳性。采用SPSS软件中卡方检验方法进行统计学分析。 结果 1、Bcl-2在正常宫颈上皮中元表达。其在CIN-L及CIN-H中的阳性率分别为28.57％和68.42％，随着CIN病变的进展bcl-2基因蛋白的表达率呈明显的上升趋势(P＜0.05)。在宫颈癌中bcl-2的阳性表达率仅为22.73％，与CIN-H相比明显降低(P＜0.05)。 2．bax在正常宫颈上皮中少量表达，表达率为5.88％。其在CIN-L及CIN一H中的阳性率分别为80.95%和63.16%，随着CIN病变的进展bax基因蛋白的表达率未呈明显的下降趋势(P>0.05)。在宫颈癌中bax的阳性表达率为31.82%，与CIN一H相比有显著降低(P<0.05)。 3.CasPase一3在正常宫颈上皮中高表达，表达率为88.24%。其在CIN一L及CIN一H中的阳性率分别为61.90%和57.89%，随着CIN病变的进展casPase一3蛋白的表达率未呈明显的下降趋势(P>0.05)。在宫颈癌中caspase一3的阳性表达率为25%，与CIN一H相比有显著降低(P<0.05)。 4、在bcl一2表达阳性的组里有29.17%病例的caspase一3表达也呈阳性，在bcl一2表达阴性的组里有72.22%病例的caspase一3表达呈阳性，二者的表达呈负相关(P<0.05)。在bax表达阳性的组里有91.89%病例的。aspase一3表达也呈阳性，在bax表达阴性的组里有29.27%病例的caspase一3表达呈阳性，二者的表达呈正相关(P<0.05)。结论 在CIN阶段bcl一2的表达随着病变的进展表现出正相关的趋势，说明这一抑制凋亡的基因在病变的早期阶段表现出抑制细胞凋亡的能力。随着病变的发展bcl一2基因蛋白的表达与caspase一3蛋白的表达呈负相关;bax基因蛋白的表达与Caspase一3蛋白的表达呈正相关。bel一2、bax、easpase一3这三者在宫颈癌中的表达比起CIN一H来明显下降，说明bcl一2以及bax基因对凋亡的调节机制在恶性变的过程中是缺失的，这也从另外一个角度说明在宫颈癌阶段凋亡的作用并没有细胞增殖能力和基因突变在肿瘤的发展中所起的作用重要。