维生素B6(VitaminB6，VB6)为水溶性维生素，是一类吡啶化合物的总称，游离型有吡哆醛(Pyridoxal，PL)、吡哆醇(Pyridoxine，PN)和吡哆胺(Pyridoxamine，PM)，相应磷酸酯形式为磷酸吡哆醛(Pyridoxal-5’-phosphate，PLP)、磷酸吡哆醇(Pyridoxine-5’-phosphate，PNP)和磷酸吡哆胺(Pyridoxamine-5’-phosphate，PMP)。其中PLP是VB6的主要辅酶形式，参与氨基酸代谢的各种反应。吡哆醛激酶（pyridoxalkinase，PLK）是VB6 关键代谢酶，在二价金属阳离子和ATP 存在下，催化游离形式VB6 各自磷酸化反应，生成相应的磷酸酯型，并且与磷酸吡哆醇氧化酶、磷酸酶一起维持细胞内PLP 浓度的动态平衡。　　 我们的前期研究采用生物信息学原理和PCR方法，构建家蚕PLK 融合基因表达质粒pET22b-His-PLK，原核表达纯化出重组蛋白，并且分析了家蚕PLK的基本酶学性质，对其蛋白结构也进行了预测。　　 本研究在此基础上将融合质粒在大肠杆菌中诱导表达，经亲和层析纯化，以纯化的蛋白为抗原免疫新西兰兔，制备多克隆抗体，ELISA检测抗体效价可达到1：51200以上。提取家蚕五龄幼虫的各组织蛋白，用于Western blot实验。实验结果表明，PLK在家蚕的精巢、马氏管、中肠、表皮、头部等组织中都有表达，且表达量依次降低，而在丝腺中没有明显检测到该蛋白的存在。我们还利用荧光定量PCR的方法，对家蚕五龄幼虫各组织中的mRNA的量进行了比较。通过从mRNA水平和蛋白质水平研究PLK基因在家蚕不同发育时期及幼虫不同组织中的转录、表达情况，明确了PLK在家蚕5龄期不同组织中的功能，为进一步探讨PLK在家蚕VB6代谢中的生物学功能提供重要依据。　　 家蚕既是用于蚕丝生产的重要经济作物，也是仅次于果蝇作为昆虫研究的模式生物，同时还是开发新一代生物反应器和新型昆虫产业的材料。家蚕在生长发育和合成丝蛋白时，体内氨基酸的合成与代谢非常活跃，其中VB6 代谢是一个重要环节。PLK在家蚕体内VB6的转换代谢中可能是一个关键控制点。研究PLK在家蚕体内的表达情况，有助于明确PLK的催化机制和表达调控机制。