拟南芥四种磷脂酶对二萜类化合物Glaucocalyxin A的响应

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为探究二萜类化合物Glaucocalyxin A对植物的化感作用机制。本研究选用Glaucocalyxin A为供体,哥伦比亚野生型拟南芥(Col-0)和四个拟南芥突变体株系(pla1-1、pla2-1、plc1-1和pldδ-2)为受体,测定了拟南芥试管苗磷脂酶活性、基因相对表达量、蛋白表达量、种子萌发率、植株形态变化、组织膜透性、渗透调节能力和光合作用相关指标。研究结果如下:(1)外施不同浓度Glaucocalyxin A处理时,Col-0型拟南芥PLA1、PLA2、PLC和PLD从转录水平和酶活性水平都对其进行了响应,并且这种响应具有浓度差异性和酶种类差异性:在低浓度Glaucocalyxin A处理下,PLA1、PLA2、PLD的转录和活性均有所抑制;而高浓度的Glaucocalyxin A对这三种酶的转录和活性均有增强作用;相同浓度下,PLD对Glaucocalyxin A的响应最为强烈,PLA1和PLA2的响应程度相当。PLC的响应趋势与其它三种酶不同:低浓度Glaucocalyxin A作用下,其基因相对表达量和酶活性发生轻微变化;而在高浓度Glaucocalyxin A作用下,PLC的基因相对表达量和酶活性均有所下降,且均随处理时间的延长逐渐降低。(2)外施不同浓度Glaucocalyxin A,对拟南芥野生型和突变体种子萌发势和萌发率均没有显著影响。(3)外施低浓度Glaucocalyxin A时,Col-0、pla1-1、pla2-1和pldδ-2四个株系的根长与未施Glaucocalyxin A相比均显著减短;而在高浓度Glaucocalyxin A时,Col-0、pla1-1、pla2-1和pldδ-2四个株系的根长均受到极显著抑制。plc1-1根长的响应趋势与其它三个株系不同:在低浓度Glaucocalyxin A作用下,其根长与对照相比无显著变化;在高浓度Glaucocalyxin A作用下,其根长受到显著抑制。外施低浓度Glaucocalyxin A处理下,五个株系的下胚轴长均显著增长,反之受到显著抑制。其中,在不同浓度Glaucocalyxin A处理下,突变体拟南芥下胚轴长总是短于野生型。(4)外施不同浓度Glaucocalyxin A后,拟南芥五个株系中电导率和丙二醛含量均显著升高。(5)不同浓度Glaucocalyxin A对拟南芥五个株系中脯氨酸(Pro)和可溶性蛋白(SP)含量均有影响,呈现出先上升后下降的趋势,于24 h达到峰值。(6)Glaucocalyxin A对拟南芥试管苗叶片PSⅡ反应中心的光保护能力有低浓度促进高浓度抑制的影响。研究表明,Glaucocalyxin A是一种化感物质,可通过调控四种磷脂酶来发挥其部分化感作用,这为系统研究该二萜化合物的化感作用机理奠定了基础,也为了解数量庞大的二萜类化合物在生态环境中潜在的化感作用提供科学依据。
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