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目的:通过观察不同浓度茶多酚对脂多糖介导下体外培养的人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cells，HPDLCs)探讨其细胞分泌因子的影响，进而探索牙周病的致病机理，为预防和治疗牙周病寻求更安全可靠的方法，进一步为临床应用茶多酚作为治疗药物奠定理论基础。
方法:1.通过改良组织块培养法体外培养第3代人牙周膜成纤维细胞，用免疫组化和碱性磷酸酶染色鉴定细胞来源及牙周膜成纤维细胞。
2.用酶联免疫吸附试验检测法观察不同浓度茶多酚(TP)对脂多糖(LPS)介导下HPDLCs分泌细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)、基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1，MMP-1）、基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）、环氧化酶-2(cyclooxyenase-2，COX-2)和Toll样受体4(toll-like receptor4，TLR4)的蛋白含量。
3.采用荧光实时定量逆转录聚合酶链式反应(Real-time-fluorescent-quantitation,Real-time PCR)检测ICAM-1、MMP-1、MMP-2、COX-2和TLR4拘mRNA表达。
结果:1.通过体外培养人的牙周膜，大约在第七天左右可见牙周膜的边缘有梭形细胞游出，经免疫组化鉴定:抗波形丝蛋白(VIM)阳性表达，抗细胞角蛋白(CK)阴性表达。碱性磷酸酶鉴定细胞阳性表达。
2.ELISA结果表明，PDLCs生LPS干预下，加入不同浓度的TP在不同的时间影响下均可抑制PDLCs分泌COX-2、MMP-1、MMP-2、ICAM-1和TLR4的蛋白含量，与LPS组比较差异有统计学意义（p＜0.05）。
3.PCR结果表明，TP可以显著抑制LPS干预下PDLCs表达COX-2、MMP-1、MMP-2、ICAM-1和TLR4 mRNA的水平，与LPS组比较差异有统计学意义（p＜0.05）。
结论:1.利用改良组织块培养法成功培养了HPDLCs，通过鉴定，培养的细胞来源于中胚层，而非上皮源性，且为牙周膜成纤维细胞，而非牙龈成纤维细胞。
2.100μg/mlTP和200μ g/mlTP可以显著抑制LPS干预下PDLCs分泌COX-2、MMP-1，2、ICAM-1、TLR4蛋白的含量。
3.100μg/mlTP和200μg/mlTP可以显著抑制LPS干预下PDLCs表达COX-2、MMP-1，2、ICAM-1和TLR4 mRNA的水平，提示TP在抗炎机制上可能与COX-2、MMP-1，2、ICAM-1、TLR4因子有关。