组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对Raji细胞株体外凋亡及细胞周期的影响

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目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilidehydroxamic acid,SAHA)对人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:采用MTT比色法观察SAHA、依托泊苷(Etoposide,VP-16)单用及两者合用对体外培养的Raji细胞凋亡的影响。采用HE染色、荧光染色观察用药后细胞形态,用流式细胞仪(Fluorescence Activated Cell Sorter,FACS)检测细胞凋亡率及细胞周期。结果:①MTT比色法测定显示SAHA能抑制Raji细胞增殖,呈剂量依赖性和时间依赖性。②SAHA与VP-16有明显的协同作用。用金氏公式判定0.5、1、2、4μmol/L SAHA与5μg/ml VP-16有协同抑制增殖作用。③流式细胞仪分析,SAHA处理组出现一特征性的亚二倍体凋亡峰。其凋亡率呈时间、剂量依赖性。联合用药时,凋亡率高于单独用药组。④流式细胞术发现单用SAHA可使Raji细胞阻滞于G0/G1期,其阻滞细胞的数量与药物浓度呈正相关,以作用48小时对细胞周期的阻滞作用最强。联合用药时,细胞周期阻滞作用明显。结论:①SAHA能有效地抑制人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖,其抗增殖作用具有时间、剂量依赖性;②SAHA可体外诱导Raji细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期,因此,诱导细胞周期阻滞作用可能是SAHA抗肿瘤的一个重要机制;③SAHA与VP-16联合对Raji细胞具有抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡协同作用。
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