γδT细胞在桥本氏甲状腺炎发病机制中的作用及干预研究

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背景:TCRγδT细胞在不同的炎症和自身免疫性疾病发病机制中起着重要的作用,全反式维甲酸具有多种免疫调节作用。  目的:探讨桥本氏甲状腺炎(Hashimotos thyroiditis,HT)患者γδT细胞与自身抗体形成之间的关系及机制;以及全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对γδT细胞辅助B细胞产生自身抗体的调控作用,寻找潜在的干预靶点。  方法:本次实验共收集148例临床标本,其中HT患者99例、健康对照者44例和5例结节性甲状腺肿患者。应用流式细胞术检测γδT细胞及其亚型的比例以及HLA-DR、CD69、ICOS和CD40L的表达水平;免疫荧光染色方法观察5例HT患者甲状腺组织中γδ T细胞的浸润情况;免疫组化观察5例HT和5例单纯性甲状腺肿患者的甲状腺组织中抗甲状腺抗体的表达情况;ELISA检测γδ T细胞与B细胞共培养上清以及ATRA处理后共培养上清液中IgG和IgM表达水平,化学发光免疫分析法检测共培养上清液中Tg-Ab和TPO-Ab表达水平;流式细胞术检测ATRA处理后γδ T细胞或B细胞的凋亡水平。  结果:HT患者甲状腺组织中γδT细胞数明显高于单纯性甲状腺肿对照组(n=5,5.33±1.20% vs.2.07±0.44%;P<0.05),其中vδ1亚型细胞占明显优势(89.7±2.6% vs.10.3±2.6%,P<0.001)。甲状腺组织中有大量γδT细胞浸润以及抗甲状腺抗体的表达。HT患者(n=19)γδT细胞表面CD69(8.42±1.08% vs.1.60±0.38%,P<0.001)、HLA-DR(58.12±6.36% vs.37.82±3.70%,P<0.05)、CD40L(1.58±0.35% vs.0.15±0.05%,P<0.01)和ICOS(2.78±0.66% vs.0.28±0.13%,P<0.01)分子的表达水平显著高于健康对照组(n=15);尤为重要的是,HT患者的γδT细胞能够促进B细胞产生抗体,在γδT细胞与B细胞共培养上清中IgG、Tg-Ab和TPO-Ab的表达水平显著高于健康对照组;ATRA通过诱导γδT细胞的凋亡机制明显抑制了B细胞抗体的表达。  结论:HT患者的γδT细胞促进了B细胞产生自身抗体;ATRA通过诱导γδT细胞的凋亡从而抑制B细胞产生自身抗体。这些结果表明γδT细胞在HT的发病机制中可能发挥着重要的作用,全反式维甲酸(ATRA)可作为HT自身免疫的一种潜在的调节物。
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