【摘 要】
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目的:检测PLCD1在乳腺癌中的表达及甲基化状态,探讨PLCD1的表达及甲基化状态与乳腺癌患者临床病理特点的相关性及其在乳腺癌中的抑癌作用。方法:通过RT-PCR、免疫组化检测PLCD1
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目的:检测PLCD1在乳腺癌中的表达及甲基化状态,探讨PLCD1的表达及甲基化状态与乳腺癌患者临床病理特点的相关性及其在乳腺癌中的抑癌作用。方法:通过RT-PCR、免疫组化检测PLCD1在乳腺癌中的表达。在线GOBO数据库分析PLCD1的表达与乳腺癌组织学分级、分期、受体的相关性。通过甲基化特异的PCR(MSP)、BGS等实验检测乳腺癌中PLCD1甲基化情况;并将96例乳腺癌患者PLCD1甲基化状态与对应的临床病理资料进行相关性分析。将PLCD1质粒转染乳腺癌细胞株MB231、MCF-7(缺失表达PLCD1),通过克隆形成实验、划痕实验和流式细胞周期测定,分别检测表达PLCD1后对乳腺癌细胞的增殖、迁移及细胞周期的影响。通过裸鼠成瘤实验,进一步验证PLCD1在体内的抑癌作用。结果:PLCD1在乳腺永生化上皮细胞株及乳腺正常组织中普遍表达,但在乳腺癌细胞株及癌组织中的表达明显下降。GOBO分析结果显示,PLCD1在正常乳腺样型及雌激素受体阳性、组织学分级Ⅰ级的乳腺癌中表达较高。MSP检测PLCD1在67%乳腺癌细胞株(6/9)和57%乳腺癌组织(55/96)中存在启动子区高甲基化。临床相关性分析显示,PLCD1的甲基化状态与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、分级及受体等特征无明显相关性。外源表达PLCD1后乳腺癌细胞株MB231、MCF-7的增殖和迁移能力明显降低,细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.001)。体内裸鼠成瘤实验显示PLCD1可明显抑制乳腺癌的生长(P<0.001)。结论:乳腺癌中PLCD1因启动子区高甲基化而表达普遍降低。PLCD1在乳腺癌中具有抑癌功能,作为乳腺癌新的候选抑癌基因,为乳腺癌的早期诊断及治疗提供了可能。
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