多重耐药鲍曼不动杆菌耐药表型及基因型分析

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目的:分析铜陵市医院感染鲍曼不动杆菌耐药性,对多重耐药菌株进行β-内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶表型检测,对各种耐药基因型进行检测分析,对菌株的基因同源性进行分子流行病学调查。方法:采用Vitek-32全自动细菌鉴定仪对2005年铜陵市各医院临床分离的134株鲍曼不动杆菌进行鉴定确认,K-B法进行药物敏感试验,检测分离菌对15种抗生素的耐药性,利用“whonet5.3”软件对耐药性结果进行分析。通过表型初筛(K-B法)和表型确认(K-B法)试验对31株多重耐药鲍曼不动杆菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测,三维试验进行ESBLs和AmpC酶检测,协同试验检测金属酶(MBL),对检测结果进行分析。采用聚合酶链反应(PCR)检测各类β-内酰胺酶类、氨基苷类抗生素耐药基因以及喹诺酮类相关gyrA基因,对结果进行分析。利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因同源性分析。结果:1、铜陵市医院感染鲍曼不动杆菌对青霉素类,第三、四代头孢菌素类,单酰胺类,氨基苷类,喹诺酮类及磺胺类抗菌药物的耐药率均>50%,多重耐药菌株近50%。对酶抑制剂类的头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低为8.2%,但中介株比例较高为44.8%。对碳青霉烯类抗生素亚胺培南耐药率最低为2.2%,出现了耐药株,甚至出现了“泛耐药(pandrug resistance)”的鲍曼不动杆菌。2、铜陵市人民医院31株多重耐药鲍曼不动杆菌中,产AmpC酶29株占93.5%;三维试验检出ESBLs菌株8株,占25.8%,表型确认(K-B法)试验检出3株,符合率37.5%;产MBL 5株,占16.1%。3、铜陵市人民医院31株多重耐药鲍曼不动杆菌中,100%携带TEM-1型广谱β-内酰胺酶基因、aacA4氨基糖苷乙酰转移酶基因、有gyrA型DNA旋转酶基因突变;30株检测到AmpC酶基因,占96.8%;29株检测到aacC1、aadA1型氨基糖苷乙酰转移酶基因,占93.5%;3株检测到OXA-23型碳青霉烯酶基因,占9.7%;各2株检测到PER型ESBLs基因和aphA1型氨基糖苷乙酰转移酶基因,分别占6.5%;未检测到SHV型β-内酰胺酶基因、VEB型ESBL基因,未检测到IMP型和VIM型金属酶基因,未检测到OXA-24型碳青霉烯酶基因。4、对30株多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学调查,结果显示27株出现显著相同条带,具有高度同源性;2株为相似性;1株为独立株。结论:1、铜陵市鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素均有较高的耐药率,对青霉素类,第三、四代头孢菌素类及β-内酰胺酶抑制剂复合制剂敏感性也显著降低,同时对氨基苷类、喹诺酮类、磺胺类耐药率较高。出现了亚胺培南耐药菌株。2、多重耐药鲍曼不动杆菌同时产生多种β-内酰胺酶:TEM-1酶、AmpC酶,OXA-23型碳青霉烯酶及金属酶。产AmpC酶在多重耐药菌株比例较大,占有重要地位。3、临床微生物实验室采用三维法测定鲍曼不动杆菌ESBLs更准确。4、多重耐药鲍曼不动杆菌株中AmpC酶基因、TEM-1型β-内酰胺酶基因、aacA4、aacC1、aadA1型氨基苷类修饰酶基因普遍存在。出现了OXA-23型碳青霉烯酶基因并导致对亚胺培南耐药。5、铜陵市人民医院存在多重耐药鲍曼不动杆菌流行株,应加强消毒隔离措施。
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