目的:角膜内皮细胞对于维持角膜的相对脱水状态起着非常重要的作用,急性闭角型青光眼患者角膜水肿明显,本研究主要探讨急性高眼压(acute ocular hypertension,AOH)对大鼠角膜内皮细胞的影响。方法:将Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为四组,穿刺对照组、AOH后即刻组、AOH后2天组、AOH后7天组。SD大鼠右眼前房灌注平衡盐液(balance salt solution,BSS)2小时建立急性高眼压模型,左眼作为正常对照。在前房灌注期间和灌注后,用手持式非接触眼压计测量大鼠眼压,裂隙灯显微镜观察各组角膜水肿情况。茜素红染色观察角膜内皮细胞形态并进行细胞计数,Ki67染色观察角膜内皮细胞的增殖情况,通过检测FITC-dextran在角膜基质中的累积量来评价角膜内皮细胞的渗透。通过免疫荧光染色法和Westernblot检测角膜内皮细胞顶端连接复合体(ZO-1、F-actin)和Na,KATPase的改变,评价角膜内皮细胞的屏障功能和泵功能。结果:前房灌注期间眼压为82.6±2.3mmHg(正常大鼠眼压范围为:10.2±0.4 mmHg)。与对照组相比,AOH后即刻组角膜出现明显水肿,荧光渗透明显增加,周边角膜内皮细胞数量明显减少且细胞形态不规则,紧密连接蛋白(ZO-1)和细胞骨架(F-actin)均被明显破坏。Na,K-ATPase也被破坏,但表达轻微增加,没有统计学意义。AOH后2天组角膜内皮细胞增殖明显,角膜内皮细胞密度恢复至正常,F-actin被破坏得更明显,角膜水肿、周边角膜内皮细胞数量、荧光渗透,ZO-1和Na,K-ATPase均恢复正常。AOH后7天组除了F-actin尚未完全修复外角膜内皮细胞的其余各项指标均恢复正常。结论:AOH 2小时可以破坏大鼠角膜内皮细胞的屏障功能及泵功能,是急性闭角型青光眼引起角膜水肿的原因。